Что делать, если стреляет в ухе

Стреляющая боль в ухе — явление короткое, но за счёт интенсивности запоминающееся. И это правильно. Дело в том, что прострелы вовсе не обязательно связаны с ухом. Они могут быть симптомами многих крайне неприятных заболеваний. Сильной болью организм привлекает ваше внимание к возможной опасности.

Почему стреляет в ухе

Причин резкой короткой боли, дислоцирующейся на первый взгляд в ухе, может быть много.

1. Ушная пробка

Серная пробка или посторонний предмет в слуховом проходе может давить на барабанную перепонку. Это улавливают нервные окончания, в избытке окружающие среднее и внутреннее ухо, и вы чувствуете стреляющую боль.

2. Акустическая травма

Мощная звуковая атака — например, на рок-концерте, в ночном клубе, на фейерверк-шоу или шумном производстве — может вызвать баротравму: растяжение или даже разрыв барабанной перепонки. Боль в ухе является частым спутником ^{подобных повреждений.}

3. Начинающийся отит

Стреляющая боль в ухе — частный симптом ушной инфекции ^{, например отита. Это неприятное заболевание чревато потерей слуха и развитием серьёзных осложнений. Поэтому при малейшем подозрении на отит необходимо немедленно обратиться к врачу. Особенно если дело касается малышей до двух лет.}

4. Кариес, зубной абсцесс или воспаление дёсен

Медицинский журнал WebMD называет ^{проблемы с полостью рта одной из возможных причин боли в ушах. Дело в том, что нервные окончания в голове тесно связаны друг с другом и боль, ощущаемая в одной области (например, в воспалённом зубном корне), нередко проецируется куда-то ещё.}

5. Воспалительные процессы в носоглотке

Ангина, фарингит, тонзиллит зачастую тоже аукаются прострелами в ушах. Причина та же, что и в пункте выше: тесная взаимосвязь нервных окончаний.

6. Невралгия

Поражение лицевого ^{или носоглоточного нерва, вызванное, например, переохлаждением, даёт о себе знать в том числе ушными болями.}

Когда надо обращаться к врачу

Выше перечислен далеко не полный перечень причин, по которым стреляет в ухе. В некоторых случаях старт боли дают:

1. Воспаление кожи головы после неудачного пирсинга.
2. Артрит либо травма челюстного сустава.
3. Воспаление мозга — менингит.
4. Всевозможные внутричерепные опухоли.

Эти заболевания могут быть чрезвычайно опасны. Поэтому, если в ухе стреляет более чем 24 часа, нужно как можно быстрее навестить лора. Другими симптомами, требующими срочного визита к медику, являются ^:

1. Появление головокружения, головной боли, отёка вокруг уха, слабости мышц лица.
2. Высокая температура (признак развивающегося воспалительного процесса).
3. Резкая продолжительная боль в ухе, которая внезапно прекратилась (это может быть симптомом разрыва барабанной перепонки).

Как уменьшить боль немедленно

Если вы уверены, что боль вызвана не опасными причинами

Например, попаданием в ухо воды во время купания или, положим, перепадом давления при авиаперелёте.

1. Пожуйте жвачку или съешьте леденец

Работа челюстного сустава поможет ^{выровнять давление в слуховом проходе.}

2. Несколько раз сглотните или широко зевните

Подобные действия тоже заставят работать челюстной сустав, что поспособствует выравниванию давления.

3. Закапайте ушные капли от пробок или жидкое масло

В состав аптечных капель от пробок входят вещества, способствующие размягчению и удалению серной пробки (например, аллантоин). Камфорное или вазелиновое масло, разогретые на водяной бане до температуры тела, имеют тот же размягчающий серу эффект.

Аптечные капли используйте в соответствии с инструкцией. Масло закапывайте по 2–3 капли (при необходимости повторите через 6–8 часов).

4. Используйте противовоспалительные ушные капли, перекись или спиртовые растворы

Они помогут в том случае, если боль вызвана попаданием инфекции в наружный слуховой проход. Такое бывает, например, во время купания в открытом водоёме или при наличии в слуховом проходе мельчайших ранок и царапинок. Эта ушная боль, как правило, не сопровождается повышением температуры.

В состав аптечных капель входят анальгетики и антисептики (например, лидокаин и феназон), которые снимают боль и борются с воспалением.

Сходный антисептический эффект имеют перекись водорода или спиртовые растворы: настойки календулы, ромашки. Если ничего из вышеперечисленных средств под рукой нет, можно воспользоваться водкой.

Аптечные капли используйте согласно инструкции. Перекись и спиртовые растворы закапывайте по 2–3 капли. Если понадобится, процедуру можно повторить через 6–8 часов.

5. Попробуйте просушить ухо феном

Это поможет удалить излишки влаги, которые, возможно, перекрывают слуховой проход. Естественно, фен при этом должен быть выставлен на комфортный тепловой режим.

Если о причинах боли вы не имеете никакого представления

В этом случае ваша цель — просто облегчить состояние до визита к врачу.

1. Приложите к уху холодный компресс

Примерно на 20 минут ^{, до уменьшения боли. А вот горячий компресс ставить категорически не рекомендуется: он может ускорить развитие воспаления и гнойного процесса, если те имеются.}

2. Примите болеутоляющее

Например, ибупрофен.

3. Активно пожуйте

Жевание может облегчить боль, вызванную излишним давлением в среднем ухе при отите.

И не медлите с визитом к отоларингологу. В лучшем случае врач просто промоет вам ушной проход. Но возможно, для избавления от боли потребуются антибиотики или даже хирургическое вмешательство.

Читайте также

Как лечить простуду: бюджетные средства, которые действительно помогают →

Как правильно пользоваться спреем для носа: пошаговая инструкция →

Почему вам не нужны противовирусные препараты →

Заболела спина и «стреляет» в пояснице в Вашем городе

Выберите специалиста:

Детский стоматологОртодонтТерапевтГигиенистПародонтологХирургОртопедПедиатрЛОРДетский эндокринолог

• Вострикова Юлия Валентиновна
  Детский стоматолог-терапевт

• Пономарева Мария Львовна
  Ортодонт детский, подростковый

• Глазырина Юлия Леонидовна
  Терапевт стоматолог, детский

• Паутова Лариса Евгеньевна
  Терапевт стоматолог, детский

• Шириханова Наталья Валентиновна
  Терапевт стоматолог, детский

• Шевцова Юлия Вадимовна
  Терапевт стоматолог, детский

• Гребенкина Виктория Алексеевна
  Терапевт стоматолог, детский

• Химчук Наталья Сергеевна
  Детский стоматолог

• Соснина Наталья Эдуардовна
  Детский стоматолог

• Харламова Анна Юрьевна
  Детский стоматолог

• Светлицкая Александра Николаевна
  Стоматолог-терапевт детский, подростковый

• Стрелкова Дарья Михайловна
  Стоматолог-терапевт детский, подростковый

• Русинова Анастасия Сергеевна
  Детский стоматолог

• Пономарева Мария Львовна
  Ортодонт детский, подростковый

• Давыдов Кирилл Андреевич
  Стоматолог-ортодонт

• Сахнов Александр Анатольевич
  Стоматолог-ортодонт

• Горева Ольга  Борисовна
  Стоматолог-ортодонт

• Мокина (Домашевич) Ольга Васильевна
  ортодонт детский, подростковый

• Кострова Вера Анатольевна
  Стоматолог-терапевт

• Мкртчян Аида Михайловна
  Стоматолог-терапевт

• Сатина Анна Сергеевна
  Стоматолог-терапевт

• Мотыль Герман Викторович
  Стоматолог-терапевт

• Чудинова Ирина Викторовна
  Стоматолог-терапевт

• Шуматова Ольга  Валерьевна
  Стоматолог-терапевт

• Елисеева Светлана Юрьевна
  Стоматолог-терапевт

• Давыдова (Аминина) Екатерина Викторовна
  Стоматолог терапевт

• Рябкова Ольга Борисовна
  Стоматолог-терапевт

• Гирш Ирина Леонидовна
  Стоматолог-пародонтолог

• Чикурова Валентина Анатольевна
  Стоматолог-терапевт

• Яковлева Полина Олеговна
  Стоматолог-терапевт

• Кучукова Гульнара Салимзяновна
  Стоматолог-гигиенист

• Агадуллина Юлия  Александровна
  Стоматолог-гигиенист

• Ярославцева Елена Павловна
  Стоматолог-гигиенист

• Пестрикова (Украинцева) Татьяна Ивановна
  детский гигиенист

• Зеленина Юлия Игоревна
  Детский стоматолог-гигиенист

• Ивонина Венера Рашидовна
  Стоматолог-гигиенист

• Пошибалкина Ольга Владимировна
  Стоматолог-парадонтолог

• Гирш Ирина Леонидовна
  Стоматолог-пародонтолог

• Ханжина Елена Владимировна
  Пародонтолог

• Майстренко Евгений Михайлович
  Стоматолог-хирург

• Ермаков Денис Валерьевич
  Стоматолог-ортопед

• Петров Кирилл Александрович
  Стоматолог-ортопед

• Заболотская Александра Николаевна
  Педиатр

• Котельникова Юлия Юрьевна
  Отоларинголог

• Красноперова Ольга Игоревна
  Детский эндокринолог

Варикоз. Сначала бьет по ногам, а потом стреляет в сердце

Кто из нас не мечтает о стройных и гладких ногах без синевы выступающих сосудов или россыпи мелких фиолетовых капилляров?

К несчастью, имеющаяся статистика малоутешительна: по разным данным от 20 до 30% людей на планете страдают варикозным расширением вен, которое делает ноги столь непривлекательными, причем у женщин заболевание возникает в пять раз чаще, чем у мужчин.

Признаки варикозной болезни ни с чем не спутать. Помимо извитых и узловатых вен, сети капилляров, появляется чувство тяжести в ногах, иногда боль и отечность, особенно после длительных нагрузок. К концу дня невозможно втиснуться в обувь, в которой еще утром было удобно и комфортно.

Варикозная болезнь может стать причиной трофических расстройств нижних конечностей вплоть до уплотнения, потемнения кожи голени и незаживающих трофических язв. Существует также риск образования в просвете варикозной вены участка тромбообразования, известного как поверхностный тромбофлебит. Это состояние расценивается как угроза жизни и требует лечения в стационаре.

Большинство пациентов, к сожалению, не беспокоятся, пока ноги просто выглядят не очень красиво, но вынуждены срочно обращаться к врачу, когда появляются отеки, боли и судороги в ногах.

Сегодня мы располагаем эффективными и бережными методами лечения, поэтому не стоит запускать болезнь. Варианты лечения венозной патологии определяются, прежде всего, формой и стадией развития заболевания. К сожалению, нельзя предложить пациенту какой-то единственный «исцеляющий» метод лечения. Лечение варикозной болезни — это кропотливый совместный труд пациента и врача-флеболога.

В наших центрах Вам проведут ультразвуковое дуплексное сканирование, которое позволит получить изображение вены, с целью выбора метода лечения варикозной болезни. Врач после детальной диагностики предложит варианты лечения, подходящие именно Вам.

С помощью введения склерозирующего раствора в расширенные вены могут быть устранены косметические дефекты. Эта амбулаторная процедура длится обычно 20 — 30 минут и происходит в несколько этапов.

Однако, несмотря на кажущуюся простоту, она требует от хирурга большого опыта и виртуозного мастерства. В пораженную вену- с помощью очень тонких игл вводится специальный раствор склерозант, который способствует ее «закрытию». В результате варикозная вена полностью исключается из кровотока и исчезает без следа. Рубцов тоже не остается. Отныне кровь пойдет только по здоровым сосудам, и состояние Вашего здоровья значительно улучшится, так же, как и внешний вид Ваших ног. Склеротерапия используется и для лечения так называемых сосудистых звездочек, которые являются признаком венозной недостаточности. Склеротерапия, проводимая в наших центрах, на длительное время, а часто и на всю жизнь гарантирует хороший косметический и медицинский результат, позволяя предупредить повторное развитие варикозной болезни.

Во время курса пациенту не приходится ограничивать свою привычную активность. Необходимо лишь соблюдать рекомендации врача, в частности, определенное время носить компрессионное белье и избегать теплового воздействия.

Медикаментозная терапия подходит пациентам с симптомами хронической венозной недостаточности и обязательно комбинируется с компрессионной терапией.

Вы не можете ничего сделать со своей наследственностью и повседневными нагрузками, но если Вы заметили на ногах россыпь темно-фиолетовых капилляров — так называемые сосудистые сеточки, то у вас есть два выхода. Первый — неправильный: навсегда отказаться от коротких юбок и надеть темные колготки. Второй — разумный, эффективный и безопасный: воспользоваться достижениями современной флебологии и вернуть ногам здоровье и красоту.

Пожалуй, выбор очевиден? Позвоните нам и запишитесь на консультацию к врачу-флебологу.

Считать проблему с венами исключительно эстетической — большая ошибка. И нет никакой причины так рисковать здоровьем — потому что с нашей помощью проблема решается достаточно быстро, абсолютно безопасно и практически безболезненно.

Подробнее о приеме врача флеболога читайте здесь

Когда в ухе стреляет. Отоларинголог — о важности лечения отитов | ЗДОРОВЬЕ: Медицина | ЗДОРОВЬЕ

Невыносимая боль в ушах, температура — симптомы, традиционные для отита, остаются в прошлом. Все чаще этот недуг ничем себя не проявляет. О том, что болезнь стала причиной менингита и абсцесса мозга, пациенты узнают, когда уже без операции не обойтись.

Мало кто хотя бы раз в жизни не сталкивался со стреляющей болью в ушах. С детства отит — одна из родительских «страшилок»: надевай шапку, иначе уши застудишь. Но, похоже, резкая боль в ухе как главный симптом этой болезни остается в прошлом. По словам отоларингологов, все чаще отиты ничем себя не проявляют. Корреспондент «АиФ – Тюмень» побеседовал с кандидатом медицинских наук, врачом высшей категории, заведующим лор-отделением детского стационара ГБУЗ ТО «ОКБ №2» Надеждой Кузнецовой.

«Двадцать лет назад, когда я начинала работать, при отите гной из ушей, можно сказать, рекой бежал, скрытых форм заболевания не было. За последние годы картина изменилась. Не менее трети всех острых воспалительных заболеваний среднего уха у детей протекает в латентной форме — когда у ребенка ничего не болит, температура тела не повышается. Это характерно не только для нашего региона, скорее общемировая тенденция. Опасность такого состояния в том, что гной не выходит наружу, а скапливается внутри и приводит к серьезным внутричерепным осложнениям. В таких случаях без операции не обойтись», — отмечает врач.

Распознать, что с ушами у маленьких детей «что-то не так», могут только очень внимательные родители. Маму должно насторожить, если младенец во время кормления начинает кричать и крутить головой, отказываться от груди или бутылочки со смесью. Такое поведение обусловлено тем, что при глотании боль в ушах усиливается. Дети до года могут теребить ушко, чесать затылок, голову о подушку. Они беспокойно спят по ночам, плачут вплоть до истерики. По словам Надежды Ефимовны, такие дети нередко наблюдаются у невролога, получают лечение, а истинная причина недомоганий остается «за кадром», диагностика заболевания запаздывает, и ребенок растет с отитом.

«Как итог — мы оперируем детей с разрушенными гноем сосцевидными отростками височной кости. Начинаешь маму подробно расспрашивать, и оказывается, что ребенок давно проявляет беспокойство, только списывали это на другие причины», — комментирует Надежда Кузнецова.

Дети после пяти лет при скрытых отитах могут говорить, что у них свистит или шелестит в ушах. Зачастую на такие жалобы мамы и папы просто не обращают внимания, отмахиваются дежурными фразами «пройдет», «ничего страшного», «бывает». Ведь у ребенка ничего не болит: он активен и выглядит здоровым.

Тяжелые последствия

Традиционно осенью у отоларингологов пациентов становится больше примерно на 30%. К отитам приводят чаще вирусные инфекции, а не переохлаждение. Связано это, прежде всего, с тропностью (привязанностью к определенным тканям, клеткам) вируса к слизистой оболочке носоглотки, слуховой трубы, барабанной полости. Вирус очень быстро вызывает отек, а отек — воспаление и боль.

«Очень часто вирусные инфекции приводят к воспалительному процессу барабанной полости. То есть любое ОРЗ, особенно у детей младшего возраста, может сопровождаться катаральном отитом», — рассказывает Надежда Ефимовна.

К тому же дети до пяти-шестилетнего возраста особенно предрасположены к отитам, так как анатомически их ухо отличается от уха взрослого человека. Слуховая труба у малышей короче и расположена более горизонтально, любая инфекция из носоглотки попадает в нее очень легко. Особенно отитам подвержены новорожденные — они часто лежат на спине, и любая жидкость или слизь может затекать в слуховую трубу и барабанную полость. Причиной заболевания может стать даже еда.

«При вирусных заболеваниях будет осложнение в виде отита или нет — зависит от местного иммунитета и от того, насколько хорошо он сработает. Любой вирус поражает слизистую носоглотки. Но при длительном насморке, который не лечится, риск получения осложнений выше», — говорит врач-отоларинголог.

Отиты могут стать причиной тугоухости, которая при отсутствии лечения приводит к задержке психоречевого развития. В первые три года своей жизни ребенок учится воспринимать различные звуки, в том числе и речь. Если он плохо слышит или испытывает проблемы с восприятием звуков, то у него неизменно возникнут трудности с пониманием речи и с ее воспроизведением. Это особенно опасно для малышей. Мамы и папы могут и не подозревать о том, что их ребенок плохо слышит.

Кстати, оценить слуховые способности ребенка родители могут и сами. Согласно нормам развития детей, в месячном возрасте грудной ребенок вздрагивает или замирает при громких звуках, в четыре месяца поворачивает голову в сторону, откуда слышится звук, появляется гуление, которое переходит в лепет. В возрасте от 8 до 10 месяцев малыш начинает произносить звуки. Если на каком-либо из этапов развития ребенка его действия не соответствуют норме, необходимо показать ребенка доктору для проверки слуха. Родителей детей дошкольного возраста должно насторожить, если ребенок перестал разговаривать, откликаться на просьбы, замкнулся в себе. Такие поведенческие особенности могут быть причиной патологии слуха.

Несвоевременное обращение к врачу часто приводит к переходу острого отита в хроническую форму, которая менее заметна. Однако именно хроническая форма чаще всего и дает тяжелые осложнения, такие, как менингит, абсцесс головного мозга, когда гной не выходит наружу, а скапливается в полости черепа. По словам Надежды Ефимовны, в последнее время врачи все чаще сталкиваются с внутричерепными осложнениями отитов. По мнению доктора, причиной этого может быть повышенный аллергический фон человека.

«Очень много аллергических отитов, аллергических риносинуситов, которые провоцируют отек слизистых и приводят к скрытым отитам», — говорит Надежда Кузнецова.

Морская вода в помощь

Избежать отитов можно только с помощью профилактики вирусных инфекций, особенно у дошкольников. Еще до поступления в сад они должны быть подготовлены: вакцинированы, закалены, осенью и весной пропивать витамины, иммуностимуляторы.

«Они помогают сформировать муконазальный иммунитет, чтобы слизистая адекватно реагировала на вирус, не сразу начала воспаляться, а адекватно «ответила». В норме слизистая сразу начинает вырабатывать секреторный иммуноглобулин, он защищает ребенка от вирусной инфекции. Если не подготовить ребенка, не выработать активный иммунитет, то при первой же встрече с вирусом ребенок заболеет», — рассказывает Надежда Ефимовна.

Для профилактики можно промывать носоглотку любыми препаратами с содержанием морской воды. Две-три недели будет достаточно, затем перерыв, и спустя полгода «морскую» профилактику можно повторить. Однако постоянно промывать носоглотку нельзя, слизистая должна нарабатывать слизь, в которой находится иммуноглобулин А, способствующий формированию иммунитета.

«Даже после того, как все симптомы отита вроде бы как прошли, нужно сходить на контрольный прием к лору. Только врач может сказать, здоров ребенок, или внутри уха еще идет воспалительный процесс. В идеале после вирусных болезней нужно проверять барабанную полость специальным аппаратом», — подчеркнула Надежда Кузнецова. Ведь нередко в недолеченных ушах болезнь бессимптомно протекает годами.

В тему

При промывке носа нельзя создавать большое давление: вода может попасть в слуховую трубу и спровоцировать отит. Промывать тоже нужно правильно: наклонить голову немного вниз и медленно, потихоньку промывать. Орошать нос должна не струя, а легкая волна. Кстати, детям пяти лет врачи вообще не рекомендуют проводить эту процедуру самостоятельно.

При грудном вскармливании есть риск попадания молока в слуховую трубу, поэтому маме во время кормления нужно на 30% поднимать руку, на которой лежит голова ребенка. После кормления грудничка необходимо подержать в вертикальном положении, чтобы остатки молока или смеси не попали из носоглотки в евстахиеву трубу и не спровоцировали развитие воспалительного процесса. Последствиями неправильного кормления могут быть скрытые отиты, непреходящие насморки, которые можно безрезультатно лечить годами.

Удалять или нет?

Удаление аденоидов родителям порой представляется единственным выходом из нескончаемой череды простудных болезней. Вроде бы как орган не первой необходимости и не очень важный, на первый взгляд, а значит, не жалко и удалить. Однако мировая тенденция такова, что все больше специалистов выступают за сохранение аденоидов. Их раннее удаление при аллергии может спровоцировать бронхиальную астму.

Стопроцентные показания к удалению аденоидов — ночные апноэ. Фото: АиФ/ Александра Горбунова

«Лимфоидная ткань закладывается внутриутробно. В период новорожденности она еще не активна, а где-то ближе к двум годам ребенка она начинает увеличиваться в размерах. Природой так задумано неслучайно. Именно в этот момент идет становление муконазального иммунитета, а лимфоидная ткань как раз отвечает за него. В ней вырабатываются лимфоциты, защищающие ребенка. Если удалить лимфоидную ткань не по показаниям, мы лишим ребенка формирования иммунного статуса и тем самым снизим его способность бороться с вирусами», — говорит кандидат медицинских наук, врач высшей категории Надежда Кузнецова.

Стопроцентные показания к удалению аденоидов — ночные апноэ, когда во сне происходит остановка дыхания, и рецидивирующие отиты. Но в последнем случае важно выяснить причину болезни. Не всегда отиты связаны с аденоидами, часто причина — в аллергии, когда удаление аденоидов не решает проблему.

Особенно важно сохранить аденоиды в период формирования иммунитета — до 6-7 лет. После наступления этого возраста лимфоидная ткань начинает уменьшаться, а к 15 годам она становится практически незаметной.

Зачем стреляют в Донбассе — Ведомости

Напряженность в Донбассе снова растет. Украинский снайпер убил сотрудника МВД ДНР, силовые подразделения республики получили разрешение открывать ответный огонь. «Подразделениям Народной милиции дано разрешение на ведение упреждающего огня на подавление и уничтожение огневых точек противника», – говорится в сообщении, распространенном пресс-службой Народной милиции ДНР.

Теперь риторика со стороны России и непризнанных республик обострится. Интенсификация обстрелов с украинской стороны, равно как и симметричные ответы, тоже ожидаема. Президент Украины Владимир Зеленский в отношении поляризации общества идет дальше предшественника и явно готовится ко второму сроку, перенося акцент с мирных инициатив в сторону национализма и военного наступления. Этому способствует и внутриполитическая ситуация, и международный контекст: США продолжают поддерживать напряженность на юго-востоке Украины.

Несвященная война

Война в Донбассе – гражданская, а не отечественная. Паспорта у большинства участников конфликта по обе стороны украинские, язык переговоров в эфире – русский. Здесь нет приказа «ни шагу назад», нет никого, кто крикнул бы: «Позади Москва – отступать некуда!» Илья Эренбург не смог бы обратиться к местным: «Убей немца!» – ведь «немца», условного чужого, просто нет. Донецкому ополченцу, стоящему на позиции под Ясиноватой, еще можно объяснить, почему он воюет против львовянина из неонацистского батальона «Азов», на плече которого татуировка «вольфсангель» («волчий крюк» – эмблема дивизии СС «Дас райх»). Но очень сложно объяснить, что он должен стрелять в уроженца соседней Авдеевки, с которым учился в одной школе на русском языке и болел за украинский «Шахтер».

Этнической или религиозной основы, на которой базируются конфликты армян и азербайджанцев, грузин и абхазов, грузин и осетин, в Донбассе нет. Этот конфликт исключительно политический. Нет даже природных или административных границ, которые могли бы очертить территорию с суверенными претензиями, обусловленными историей и географией. Оба «Минска», подписанные после котлов в Иловайске и Дебальцеве, определили границы непризнанных республик в том виде, в котором они случайным образом оформились в результате боевых действий. Отсюда еще одна большая проблема национального и государственного строительства в Донбассе и еще один большой вопрос: какова цель?

В разное время руководители непризнанных республик обозначали разные цели. Один из лидеров «русской весны», Андрей Пургин, и покойный глава ДНР Александр Захарченко вспоминали Донецко-Криворожскую республику (ДКР) – первоначально образованную в составе РСФСР территорию Донецка, Луганска, Харькова, Днепропетровска, Запорожья, Херсона, Николаева и прилегающих областей в 1918 г. У памятника руководителю ДКР большевику Артему руководство ДНР проводило митинги и говорило о преемственности. «Народный губернатор» Донецка Павел Губарев и руководитель ополчения Игорь Стрелков в самом начале конфликта ратовали за Новороссию. Захарченко, уже во времена сближения с писателем Захаром Прилепиным и политтехнологом Александром Казаковым, говорил о создании Малороссии. В 2017 г. он зачитал в Донецке конституционный акт, провозглашавший создание нового государства «вместо и на месте» Украины. Идея закончилась ничем, поскольку была интеллектуальным упражнением новых советников, а не оформлением политической реальности.

В 2014–2021 гг. цели, которые обозначало руководство непризнанных республик, менялись от «нам нужна вся Украина» до «дойти до границ областей». Это как раз и является частью того безвременья и неопределенности, от которых так устали люди. Вопрос к России «когда вы заберете нас?» был популярен в самом начале конфликта, когда сохранялась массовая надежда на то, что «будет, как с Крымом». Сейчас он сменился на другой вопрос: ради чего мы воюем, какой смысл вообще сейчас стрелять?

Тоска по вчерашней Украине

Моя предыдущая статья в «Ведомостях» на эту тему («Донбасс ближе к Украине, чем принято считать», 15 февраля 2020 г.) вызвала широкое обсуждение, однако часть читателей неверно истолковали ее, сочтя, что в ней обосновывается преобладание в Донбассе проукраинских настроений над пророссийскими. Это не так. Вместе с тем картина массовых настроений в Донбассе гораздо сложнее, чем ее рисуют российские федеральные телеканалы и некоторые другие медиа. В 2019–2020 гг. коллеги по моей просьбе проводили в ДНР большое социологическое исследование посредством глубинных интервью с применением психографического метода, когда ответы просят не проговаривать, а рисовать. Пока это исследование еще не опубликовано в академическом журнале и является только частью моей готовящейся докторской диссертации, т. е. не обсуждено в научном сообществе. Однако обозначить предварительные тенденции я уже могу.

Украина и ДНР по-прежнему воспринимаются как стороны, ответственные за войну, но у «армейской» и «властной» Украины при этом сформирован однозначный образ агрессора, который в сознании у значимого числа респондентов разделяет нацистскую идеологию. Украинская армия (в отличие от «защищающей» российской) в массовом сознании воспринимается как несущая разрушения и смерть. При этом украинские культура и природа вызывают в памяти респондентов исключительно светлые образы.

Массовое сознание четко разделяет Украину как государство (агрессия, дерусификация и неонацизм), украинские власти (презрение к конкретным лидерам, высочайший уровень коррупции всей властной корпорации, отсутствие суверенитета, полная подконтрольность США) и украинское общество, по отношению к которому испытывает ностальгические эмоции. К этой последней Украине стремятся жители непризнанных республик – к чемпионату Европы по футболу – 2012 и новейшему аэропорту, открытому в Донецке, к Донбассу как ключевому промышленному центру страны, к мирному времени, когда родной русский язык преподавался в украинских школах, к Донецку как городу роз, а не месту обстрелов. Украинцы из той страны – «заблудшие братья» и «наши сограждане». Здесь на массу влияют ностальгия по миру, неустроенность нынешней жизни и ощущение безвременья, а не стремление стать коллаборантами, забыв жертвы.

Россия желаемого завтра

Россия – это «образ желаемого завтра» дончан. В этой стране, в их представлении, качественные дороги, высокий уровень образования, множество карьерных развилок для молодых людей и в целом высокий уровень жизни. В отличие от Украины, находящейся, по мнению респондентов, в состоянии раскола, Россия, напротив, пространство притяжения земель. Эта Россия – мощное и сильное государство с передовыми технологиями, уважаемым лидером (Путин – наиболее часто употребляемая персоналия) и мощной армией, способной защитить и своих граждан, и жителей ДНР от украинской и – шире – американской агрессии (таковая проявляется, по мнению респондентов, через тотальный контроль за действиями украинских властей). Россия в отличие от Украины «не переписывает историю», а, наоборот, «чтит традиции». Число респондентов, описывающих Россию прежде всего как пространство социально-экономического расслоения и огромной диспропорции между столицами и регионами, невелико, но образ страны в их сознании вполне конкретизирован.

Общим для России и Украины являются их частые изображения при помощи «США»: в первом случае страна борется с этим государством, во втором является его марионеткой. Россия, несмотря на присутствие военных и армейских образов, не воспринимается как участник конфликта. Но и у этого образа есть негативные черты: таможня, государственная граница, утраченные надежды и ощущение неоправданных ожиданий относительно судьбы региона, который так и не вошел в состав государства, а кроме того, отгораживается формальными барьерами от «своих же людей».

Народная республика как «серая зона»

В массовом сознании не закрепился образ территории ДНР или ее официальных символов. Пока это, скорее, система бюрократии для граждан, нежели образ отечества. В то же время будущее республики представляется крайне негативным, хотя и не определяется четко. Нет ни одного образа, который отображал бы будущее ДНР позитивно, – «дыра», «тонущий «Титаник», «туман» и проч. Собственные элиты не вызывают того же презрения и ненависти, как украинские, но их не уважают. По мнению респондентов, они коррумпированы, некомпетентны, не в состоянии обеспечить целевое расходование российской помощи, не обладают лидерскими и харизматическими качествами, оказались на своих постах случайно, не заинтересованы в развитии территории.

Образ самой ДНР в настоящий момент крайне негативен, на что очевидное влияние оказывает война. Это «серая зона» без драйверов развития, без международного признания, без будущего, с крайне низким уровнем социально-экономического развития территория, из которой постоянно идет отток людей, которая контролируется людьми со слабыми управленческими навыками, при этом излишне зарегулированная, не предоставляющая возможности для реализации гражданских прав, без уважения к личности отдельного человека. Самое главное – у этого образа нет черт личной собственности, каких-то признаков, которые позволяли бы респондентам сказать «да, сейчас плохо, но это мой дом и я должен воевать за него».

Война не воспринимается как священная и оборонительная, как необходимость или как личное (семейное) дело. В массовом сознании она представляется константой без конечной цели и направления движения войск. Учитывая, что ожидания от этой войны, по мнению значимой части респондентов, оказались неоправданными («не получилось, как с Крымом»), возникает вопрос о смысле ее продолжения. Несмотря на явное восприятие Украины-государства как агрессора, ее образ внешнего врага не является настолько значимым, чтобы угрожать самому существованию респондентов. С одной стороны, ответственность за разрушения и смерти респонденты четко возлагают на Киев, с другой – у украинского общества и культуры, во-первых, сохраняются позитивные коннотации в массовом сознании жителей Донбасса, во-вторых, политический режим ДНР, жестко ограничивая права и свободы, не предъявляя при этом значимых социально-экономических успехов, также несет угрозу гражданам.

Отсюда я и делаю вывод о том, что миротворческий потенциал населения ДНР высок и, если сложится определенная политическая конъюнктура, весьма существенная его часть будет готова к реинтеграции в состав Украины. Этому способствует и малоуспешное (с точки зрения респондентов) функционирование самих институтов республики, и непассионарность политического класса ДНР, который не смог сформулировать весомых причин для сохранения этой территориальной и политической структуры.

Екатеринбург: бывший сотрудник МВД открыл огонь по прохожим с балкона, ранены двое

30 мая 2021

Обновлено 31 мая 2021

Автор фото, Артём Устюжанин/Е1.RU

В Екатеринбурге бывший сотрудник правоохранительных органов открыл стрельбу по прохожим с балкона жилого дома. Ранения получили сотрудник Росгвардии и ребенок. На место прибыли подразделения специального назначения, которые штурмовали его квартиру и задержали стрелка живым.

Мужчина начал стрелять с балкона своей квартиры по адресу ул. Бородина, 30 в екатеринбургском районе Химмаш.

В Следственном комитете подтвердили, что он был вооружен охотничьим карабином.

«Это карабин «Вепрь», он может стрелять очередями. На ствол имелось официальное разрешение с 2010 года, которое он неоднократно продлевал», — сказал руководитель пресс-службы регионального Главного управления МВД Валерий Горелых

Задержанного отвезли на медицинское освидетельствование, сообщил «Интерфаксу» Валерий Горелых.

«Сотрудники полиции повезли под конвоем задержанного на медицинское освидетельствование для того, чтобы установить, в каком конкретно состоянии он находился, под влиянием чего он совершил столь тяжкое преступление», — сказал Горелых.

Очевидцы сообщили «Интерфаксу», что стрелявший был пьян и несколько дней находился в запое.

«По предварительной на данный момент информации, стрельбу открыл бывший сотрудник полиции. Как предполагается, он стреляет из охотничьего ружья, зарегистрированного на него», — сообщал источник агентства ТАСС. «И нарколог, и психиатр выдали ему соответствующие заключения, не препятствующие получению лицензии на оружие», — сказал другой собеседник агентства в правоохранительных органах.

Задержанный сделал как минимум 10 выстрелов. Одна из пуль попала в ногу сотруднику Росгвардии, другая — в живот девятилетней девочке.

«Девочка в крайне тяжелом состоянии госпитализирована в детскую городскую больницу. Взрослый мужчина — с травмами средней тяжести», — заявил источник агентства Интерфакс в областном Минздраве. По данным СМИ, пуля попала девочке под селезенку. Позже представитель МВД сообщил агентству ТАСС, что ей делают операцию, и «врачи борются за ее жизнь».

В отношении задержанного заведено уголовное дело по статьям о покушении на убийство малолетнего и посягательстве на жизнь сотрудника правоохранительного органа. По второй статье ему грозит пожизненное лишение свободы.

В СКР подтвердили, что мужчина был пьян. «У меня есть информация, что он находился в состоянии опьянения, поэтому вряд ли он мог оказать, так скажем, серьезное сопротивление при непосредственном контакте с сотрудниками правоохранительных органов», — сказал представитель регионального управления комитета Максим Чалков.

Бывший милиционер

Издание 66.ru сообщает, что стрелявший был ветераном боевых действий в Чечне, а сейчас работает в одном из частных охранных предприятий. «Он долгое время пребывал в депрессии, много пил», — сказал один из соседей стрелявшего агентству Интерфакс. Еще одна соседка рассказала e1.ru, что он «адекватный всегда был» и «никогда не было никакой агрессии».

Представитель областного МВД Валерий Горелых подтвердил, что стрелявший служил в МВД. «Его уволили из органов внутренних дел порядка 10 лет [назад], еще до реорганизации милиции в полицию. Работал он рядовым инспектором ППС в звании старшего прапорщика,» — сказал он.

Автор фото, Artyom Novoselov/E1.RU

Подпись к фото,

Фото, сделанное на месте происшествия

Представители Росгвардии сообщили агентству ТАСС, что персонал одного из соседних магазинов «нажал кнопку тревожной сигнализации», после чего на место происшествия прибыли сотрудники вневедомственной охраны. «Выйдя из служебного автомобиля, [они] попали под огонь злоумышленника», — сказал сотрудник пресс-службы. Раненый сотрудник Росгвардии получил «касательное ранение в ногу», сообщает агентство.

Жителей дома эвакуировали, вокруг него было выставлено оцепление, после чего сотрудники отряда специального назначения начали штурм квартиры. Стрелок был задержан живым, хотя, как сообщил представитель СКР, во время операции он пытался отстреливаться. Перед этим в квартире раздался взрыв, ТАСС уточняет, что во время штурма использовались светошумовые гранаты.

Автор фото, Donat Sorokin/TASS

Стрелявший никаких требований не выдвигал. Местный сайт e1.ru сообщает со ссылкой на слова одного из очевидцев, что мужчина кричал «что-то типа «требую отменить гомосексуализм!», а затем начал стрелять по росгвардейцам и прохожим». По данным источника этого издания, перед началом стрельбы он разослал своим знакомым сообщение: «надоела жизнь, сегодня умру и всех постреляю».

В областном МВД заявили, что задержанный вскоре будет доставлен на допрос.

Лукашенко разрешил силовикам стрелять в толпу / СНГ / Независимая газета

Белорусское законодательство корректируется под сложившуюся практику

Александр Лукашенко расширил права работников силовых структур. Фото с сайта www.president.gov.by

Использовать боевое оружие и спецтехнику для разгона протестов теперь в Белоруссии можно будет законно. Силовики не будут нести ответственность за вред, причиненный оружием. Государство обещает защитить их от гнева народа и самосуда.

В понедельник пресс-служба Александра Лукашенко сообщила, что он подписал два закона: «О государственной защите» и «Об изменении законов по вопросам обеспечения национальной безопасности». Ранее эти документы приняли обе палаты белорусского парламента. Текст документов пока не опубликован, в силу они вступают через месяц. Об их содержании можно судить на основании той информации, которую сообщают официальные источники. В частности, сообщается, что степень гласности деятельности органов внутренних дел будут определять они сами «в рамках законодательства».

Также силовики получают право использовать боевую и специальную технику для разгона протестов и не нести ответственность за вред, который они причинят в ходе применения силы, оружия и спецсредств, «если применение осуществлялось законно». Работники милиции получат право запрещать гражданам «снимать фото и видео при проведении процессуальных действий, охране порядка, обеспечении личной и общественной безопасности», «записывать аудио и видео окружающей обстановки и иных людей».

Собственно говоря, все эти правила уже действуют, несмотря на отсутствие их в законодательстве. Белорусские силовики с начала протестов сохраняют анонимность – они закрывают лица балаклавами, никогда не представляются, в суде дают показания тоже с закрытыми лицами, называя себя Ивановыми Иванами Ивановичами, Петровыми Петрами Петровичами и т.д. Также их действия по отношению к гражданам ничем не ограничены. Сейчас они не только могут беспрепятственно запретить фото или видеосъемку, но и задержать самого гражданина без объяснения причин.

Например, в понедельник состоялся суд над журналисткой портала TUT.BY Любовью Касперович. Ее задержали еще в пятницу возле здания суда, где проходит процесс над студентами, которых обвиняют в организации протестов. Девушка готовила материал об этом и имела официальную аккредитацию суда. Как она рассказала, никто не предъявил ей никаких обвинений и не объяснял причин задержания. Во время суда сотрудник милиции в балаклаве Иванов Иван Иванович утверждал, что она принимала участие в незаконном массовом мероприятии у здания суда. По такой же схеме у здания суда в Могилеве были задержаны журналисты Александр Бураков и Владимир Лапцевич, они получили по 20 суток административного ареста.

Безнаказанность и вседозволенность силовиков стали причиной их травли со стороны знакомых и незнакомых граждан – не рассчитывая на государство, люди пытались наказать их сами. Однако белорусские суды жестоко карали граждан, посмевших что-либо написать о силовиках и тем более дотронуться до них. Реальные сроки люди также получают за моральные страдания силовиков. Так, 14 мая началось рассмотрение дела 29-летней Мии Миткевич. За три поста с осуждением насилия, развернувшегося на улицах Белоруссии после выборов, и заявлением «пусть с ними все то случится, что они делают белорусскому народу» девушке грозит пять лет колонии. Ранее убитый силовиками в Бресте Геннадий Шутов и вовсе посмертно признан виновным в сопротивлении им.

Закон «О государственной защите», который Лукашенко подписал, продолжает эту политику защиты силовиков от народного гнева. В частности, документом расширен перечень категорий лиц, которым может быть предоставлена государственная защита вплоть до смены внешности и сферы деятельности им и их родственникам. Если раньше на это могли рассчитывать судьи, сотрудники правоохранительных и контролирующих органов, органов госохраны, то сейчас – военнослужащие любых войск и формирований «в случае осуществления охраны общественного порядка», сотрудники Службы безопасности президента и Оперативно-аналитического центра при президенте, а также «иные лица» «в связи с посягательством на их безопасность», а также близкие родственники всех этих граждан.

«Завершается процесс законодательного оформления в Беларуси состояния террора. Теперь власть и обслуживающий ее персонал на уровне законодательства являются террористами», – оценил новшества законодательства политолог Павел Усов. «Закон» наделяет их ничем не ограниченным правом на насилие и произвол», – констатирует он в своем Telegram-канале. «Террор становится коллективным продуктом… Конечная цель политики Лукашенко, как и любой тирании, сделать так, чтобы как можно больше людей в структурах власти повязать кровью, то есть сделать их преступниками. Коллективный террор и диктатура – лучший способ стабилизировать систему. Чем больше будет послушных исполнителей, тем дольше будет существовать режим», – считает эксперт.

Напомним, что в конце прошлой недели Лукашенко подписал законы о недопущении реабилитации нацизма и противодействии экстремизму. Понятие экстремизма в нем трактуется довольно широко. Например, распространение заведомо ложных сведений о политическом, экономическом, социальном, военном или международном положении страны – это экстремизм. По сложившейся белорусской практике, ложные сведения – это все те, которые не соответствуют государственной пропаганде. Призывы к участию в несанкционированном массовом мероприятии – тот же экстремизм. Де-факто любой протест – это уже экстремизм, потому что разрешенных массовых акций протеста в Белоруссии не бывает. Согласно новому законодательству, экстремистскими материалами могут быть признаны символика и атрибутика. Это подводит законодательную базу под широко применяемую сейчас практику арестов за бело-красно-белые носки, зонты, шарфы и прочие предметы одежды и быта. По старому законодательству это признается пикетом. После вступления закона в силу ношение таких предметов уже можно будет квалифицировать как экстремизм и нести уголовную ответственность. 

Минск

Определение стрельбы по Merriam-Webster

\ закрыть

\

выстрелил\
ˈShät

\; стрельба

переходный глагол

1а (1)

: для выброса, толкания или толчка путем внезапного ослабления натяжения (например, тетивы, рогатки или легкого движения пальца)

стрелять из стрелы стрелять в мяч стрелять в шарик

(2)

: для того, чтобы выбить или вызвать выдвижение в результате взрыва (например, порохового заряда в огнестрельном оружии или воспламененного топлива в ракете).

(3)

: для движения вперед или для движения вперед из-за внезапного выброса газа или воздуха

стрелять дротиками из духовки паровая катапульта стреляет по самолетам с авианосца

(4)

: для продвижения (чего-либо, например, мяча или шайбы) к цели путем ударов или толкания частью тела (например, рукой или ногой) или предметом.

также

: забьет таким образом

стрелять по победным воротам стрелять в корзину

(5)

: часто отбрасывать, отбрасывать или отбрасывать с силой

стрелять в кости лошадь стрелять всадника из седла

б

: заставить (что-то, например, ружье или лук) запустить ракету

с (1)

: произносить (слова или звуки) быстро, внезапно или с силой

выпустить поток оскорблений

(2)

: излучать (свет, пламя, дым и т. Д.) внезапно и быстро

(3)

: посылать внезапно или интенсивно

выстрелил гневный взгляд на них

d

: для разгрузки, опорожнения или опорожнения, особенно путем переворачивания, переворачивания или направления в затвор

а

: для нанесения удара ракетой, особенно из лука или ружья.

особенно

: , чтобы ранить или убить ракетой, выпущенной из лука или огнестрельного оружия.

б

: удалить или уничтожить с помощью огнестрельного оружия

выстрелил из света

также

: крушение, взрыв

3а

: , чтобы толкать или сдвигать (что-либо, например, дверной засов или замок) в или из крепления.

б

: толкать или толкать вперед : выступ

жабы стреляют языком

c

: для выращивания

d

: для резкого размещения, отправки или перевода в нужное положение

4а (1)

: для участия (спорт или игра, или часть игры, которая включает стрельбу) : играть

стрелять в бильярд стрелять в гольф стрелять в кости

(2)

: для достижения (определенного результата) в игре со стрельбой

выстрелить 80 в гольф

б (1)

: для размещения или предложения (ставки) на результат розыгрыша костей

выстрелить 5 долларов

(2)

: , чтобы израсходовать или как будто сделав ставку : выхлоп

застрелил своего годового бонуса за теневую сделку

5а

: для охоты и убийства (диких птиц или животных) с применением огнестрельного оружия, особенно в качестве спорта.

стрелять вальдшнеп

б

: для охоты

выстрелить в лесной массив

6а

: вызвать внезапное или быстрое движение вперед

выстрелил машину на шоссе

б

: для быстрой отправки или перевозки : для отправки

выстрелите в меня письмом, как только получите его

7

: для изменения цвета, как если бы он разбрызгивался полосами, пятнами или пятнами

8

: быстро пройти мимо, мимо или вдоль

стрельба по порогам

9

: для выравнивания (чего-либо, например края доски) прямо или верно

б

: для воздействия взрывом

11

: для определения высоты

12

: , чтобы сделать снимок или серию изображений или телевизионных изображений : фотография, пленка

13а

: для инъекции

б

: для инъекции (запрещенного наркотика), особенно в кровоток.

непереходный глагол

1а

: идти или проходить быстро и стремительно

искры стреляли по его ногам выстрелили из-под него

б

: двигаться вперед силой импульса

c

: — внезапный поток : — рывок

d

: метаться внутрь или как будто в лучах источника света

е

: дротик с пронзительным ощущением

боль выстрел в мою руку

2а

: , чтобы двигатель или оружие выпустили ракету.

б

: использовать огнестрельное оружие или лук специально для занятий спортом (например, на охоте).

3

: для запуска ракеты

пушки, стреляющие на много миль

5а

: расти или прорастать за счет или как бы путем появления побегов

c

: пружинить или подниматься быстро или внезапно

— часто используется с до при резком росте он снимал до шести футов цены снимал вверх

6а

: для движения объекта (например, мяча) определенным образом

б

: , чтобы направить мяч или шайбу к воротам.

8

: для вставки в застежку или из нее

болт, который стреляет в любом направлении

9

: для записи чего-либо (например, на пленку или видеокассету) с помощью камеры

10

: начать говорить

— обычно используется как повеление: ОК, стреляй, что ты скажешь

стрелять в

или стрелять для

стрелять от бедра

: действовать или говорить поспешно без учета последствий

выстрелить

: на исчерпание своих возможностей и ресурсов

стрелять в наручники

: затягивать манжеты рубашки ниже манжеты пальто.

: действовать против собственных интересов

трепаться

стрелять в дерьмо

снимать работы

1

: рискнуть всем своим капиталом на одной игре

2

: приложить все усилия

1

: отправка нового роста или отправленного роста: например,

а

: стебель или ветвь с листьями и придатками, особенно когда они еще не созрели.

2а

: стрельба (как из лука или огнестрельного оружия):

(2)

: ракетные стрельбы, особенно артиллерийские.

б (1)

: на охоту или вечеринку

(2)

: право на стрельбу из дичи на определенной территории или земле, на которой она проводится.

с (1)

: стрелковый матч

стрельба по тарелочкам

(2)

: раунд бросков в стрелковом матче

d

: действие или случай съемки камерой : сеанс или серия сеансов фотографирования или видеосъемки

съемка фильма

3а

: движение или движение быстрого толчка: например,

(1)

: внезапное или быстрое продвижение

(2)

: мгновенное ощущение рывка : приступ боли

(4)

: темп между гребками в гребле

б

: луч лучей : луч

выстрел солнечного света

4

[вероятно, по народной этимологии от французского желоб — подробнее на желобе]

а

: поток воды вниз по крутому склону или порогу.

б

: место, где ручей течет или быстро спускается.

—Используется для выражения раздражения или удивления

подозреваемых в Тусоне стреляют в скорая помощь, полицию и пожарных, в результате чего один мертвый, четверо ранены

Бандит, стрелявший в парамедиков, пожарных и полицию в трех местах в Тусоне, штат Аризона, в воскресенье днем ​​убил мирного жителя и оставил четырех раненых.

В ходе того, что начальник полиции Тусона Крис Магнус назвал «чрезвычайно сложной серией инцидентов», еще один человек погиб в результате пожара в доме.

Звонок по поводу пожара в доме в Южном Тусоне поступил первым, в 15:46, сказал Магнус. Три минуты спустя полиции сообщили, что мужчина выстрелил в скорую помощь, которая отреагировала на не связанный с ней вызов врача, в парке Куинси Дуглас, примерно в миле от

Водитель и пассажир скорой помощи были сбиты, но один из них смог — звонок в полицию и описание подозреваемого и автомобиля, на котором он уехал, — сказал Магнус.

Один из врачей скорой помощи, 20-летний мужчина, получил огнестрельное ранение в голову и был госпитализирован в критическом состоянии, а другой, 20-летняя женщина, получил огнестрельное ранение в грудь и руку и находился в стабильном состоянии.

Вернувшись на место пожара в доме, пожарные и соседи пытались взять его под контроль, когда подозреваемый подъехал и начал стрелять в них.

Сосед был убит выстрелом в голову, а пожарный капитан получил ранение в руку и находится в хорошем состоянии, сказал Магнус.У другого соседа пуля задела голову, он в хорошем состоянии.

Когда подозреваемый покинул место пожара, его заметил офицер, но подозреваемый врезался в автомобиль офицера, остановил его и начал стрелять в него. Офицер открыл ответный огонь и ударил подозреваемого, личность которого не установлена. По словам Магнуса, 35-летний мужчина госпитализирован в крайне тяжелом состоянии. Офицер, стрелявший в него, не пострадал.

Другой человек был найден сильно обгоревшим и мертвым в огне.Отношения между этим человеком и подозреваемым неизвестны.

Двое или трое детей, связанных с домом, которые считались пропавшими без вести, позже были найдены живыми, сержант. Ричард Градиллас написал в Твиттере в понедельник. Их отношение к подозреваемому также неизвестно.

«Это одновременно и в высшей степени трагичный, и поистине ужасный инцидент со многими неизвестными на данный момент, который потребует длительного и сложного расследования», — сказал Магнус.

Мэр Тусона Регина Ромеро сказала, что пожарная служба и полицейское управление получили ее полную поддержку.«Это был ужасный и бессмысленный акт насилия», — написала она в Twitter.

Элиша Филдштадт — репортер новостей NBC News.

Женщина стреляет в офицера во время парада в июне, убита

Нур Рахал,
Детройт Фри Пресс

ФЛИНТ, Мичиган — Полиция штата Мичиган ведет расследование после того, как офицер полиции Флинта смертельно застрелил женщину, которая, по их словам, застрелила первую, когда полицейский работал на проезжей части во время парада за июнь.

Государственная полиция в твиттере сообщила, что предварительное расследование показало, что около 14:14 одинокий человек в автомобиле подъехал к офицеру, выстрелил в него, а затем тот выстрелил в ответ.

19-летняя женщина позже скончалась в больнице из-за полученных травм, лейтенант полиции штата Мичиган.Ким Веттер сообщила Detroit Free Press.

Офицер не пострадал, говорится в сообщении Департамента полиции Флинта.

Сотрудник полиции в настоящее время находится в оплачиваемом отпуске, пока расследование еще не завершено, в соответствии с политикой полиции Флинта, сказал Веттер.

Полиция Флинта потребовала от полиции штата взять на себя расследование.

Офицер работал на проезжей части во время городского парада чемпионов в июне во время стрельбы. Уроженка Флинта и двукратная олимпийская чемпионка Кларесса Шилдс была назначена главным маршалом мероприятия, и новостная организация Flint Beat сообщила, что маршрут парада был изменен, чтобы избежать места стрельбы.

Free Press обратилась к потенциальным свидетелям за дополнительной информацией.

[ПРОЧИТАЙТЕ: знамение грядущих событий? Что мы можем узнать из засад полиции Филадельфии и Лос-Анджелеса]

© 2021 www.freep.com. Посетите freep.com. Распространяется компанией Tribune Content Agency, LLC.

Полицейский «Аврора» стреляет в машину во время расследования домашнего насилия рано утром в понедельник

АВРОРА | Офицер полиции Авроры в понедельник утром выстрелил в направлении машины, которая ехала им навстречу на стоянке 7-Eleven, хотя неясно, попал ли кто-нибудь в аварию.

По словам следователей, инцидент произошел из-за звонка диспетчерам по поводу домашнего насилия, полученного от женщины вскоре после полуночи 12 июля, говорится в пресс-релизе.

Полицейские Авроры нашли женщину, которая позвонила в службу 911, в магазине 7-Eleven на углу Ист-Хэмпден-авеню и Саут-Чемберс-роуд. Затем власти попытались организовать встречу с человеком, который предположительно причинил вред женщине во время столкновения с домашним насилием.

Примерно через 20 минут в 12:30 a.м, белый Ford Taurus въехал на стоянку у круглосуточного магазина и направился к находившемуся поблизости полицейскому, по словам офицера Кристал Маккой, представителя департамента полиции Авроры.

Затем неназванный офицер выстрелил в автомобиль, который скрылся из этого района, сказал Маккой.

Офицер не был ранен во время столкновения, и неизвестно, сколько выстрелов было произведено и где был ранен Телец. Офицер, стрелявший из их оружия, находится в полиции Авроры с февраля прошлого года.

Как и в понедельник утром, полиция не знает, кто вел Taurus и был ли кто-либо ранен в машине в результате стрельбы. Следователи также не знают, действительно ли водитель Taurus был человеком, разыскиваемым по первоначальному инциденту, связанному с домашним насилием.

Полиция сообщила, что несколько офицеров на месте происшествия активировали свои нательные камеры во время столкновения. По словам полиции, офицер, разрядивший оружие, ранее не стрелял из пистолета при исполнении служебных обязанностей.

Инцидент должен быть передан в региональную следственную группу в судебном округе, обслуживающем округ Арапахо.Полиция Авроры присоединилась к группе проверки в начале этого года как средство обеспечения большей прозрачности.

Всем, кто мог быть свидетелем стрельбы или может иметь информацию о водителе Taurus, рекомендуется позвонить в Денверский городской центр по борьбе с преступностью по телефону 720-913-7867. Типстеры могут оставаться анонимными и иметь право на вознаграждение до 2000 долларов.

Инцидент рано утром в понедельник стал вторым менее чем за неделю, когда офицер полиции Авроры выстрелил в человека, которого считали разыскиваемым в связи с предполагаемым преступлением.6 июля сотрудники спецназа «Аврора» застрелили человека, разыскиваемого по обвинению в убийстве, в мотеле на Ист-Колфакс-авеню.

Пара июльских инцидентов — единственный раз, когда публично сообщалось, что офицер Авроры стрелял в подозреваемого в 2021 году.

Снято на камеру: ливийская береговая охрана стреляет в лодку для мигрантов | Migration News

Морская спасательная группа стала свидетелем того, как ливийские власти стреляют в переполненную лодку, чтобы не дать ей пересечь Средиземное море в Европу.

Некоммерческая группа спасателей на море ударила по береговой охране Ливии после того, как стала свидетелем того, что ливийские морские власти преследовали переполненную лодку с мигрантами и стреляли в ее направлении, явно пытаясь помешать ей пересечь Средиземное море в Европу.

Члены немецкой неправительственной группы Sea-Watch засняли инцидент в среду во время полета над этим районом в рамках наблюдательной миссии.

«Тех, кто стреляет в беженцев и пытается опрокинуть их лодки, нет, чтобы спасти их. ЕС должен немедленно прекратить сотрудничество с так называемой ливийской береговой охраной », — цитируется Феликс Вайс в заявлении группы, опубликованном вместе с видео.

На кадрах, снятых с самолета, видно, что за голубой деревянной лодкой с маленьким двигателем и по меньшей мере двумя десятками человек на борту на большой скорости следуют ливийские береговые службы.

Во время погони, которая происходила в международных водах в рамках поисково-спасательных операций Мальты, можно было увидеть людей в военной форме на ливийском судне, которые стреляли по меньшей мере два раза в сторону лодки, причем пули попали в воду рядом с лодкой.

Вчера #Seabird стал свидетелем жестокого нападения так называемой ливийской береговой охраны в глубине мальтийской зоны SAR. Наше видео показывает: В направлении лодки велись выстрелы, так называемая береговая охрана Ливии несколько раз пыталась протаранить лодку и бросала предметы в людей.pic.twitter.com/0C2YSmcPoO

— Sea-Watch International (@seawatch_intl) 1 июля 2021 г.

Ливийская береговая охрана несколько раз опасно приближалась к тому, чтобы врезаться в лодку.

Sea-Watch сообщила ливийским властям по радио, что они ставят под угрозу жизнь людей, находящихся на синем судне, и призвала их прекратить стрельбу.

Ливийская береговая охрана ответила на ломаном английском, что они пытаются спасти мигрантов.

Самолету Sea-Watch не хватило топлива, и он повернул назад до того, как погоня закончилась, говорится в заявлении. Позже он получил сообщения о том, что лодка прибыла на итальянский остров Лампедуза в четверг утром.

Никаких комментариев по поводу инцидента из Ливии, Мальты или властей на Лампедузе не последовало.

Европейский Союз обучает, оснащает и поддерживает ливийскую береговую охрану для перехвата людей, пытающихся пересечь Центральное Средиземноморье в Европу.

Известно, что по крайней мере 723 человека погибли или пропали без вести, путешествуя по этому маршруту на непригодных для плавания лодках в этом году.

Около 15 000 мужчин, женщин и детей были перехвачены ливийской береговой охраной и возвращены к берегам Ливии с начала года по 26 июня, что является рекордным числом.

С 2014 года более 20 000 мигрантов и беженцев погибли, пытаясь пересечь Средиземное море в Европу.

В этом году на участке Центрального Средиземноморья между Италией и Ливией после некоторого затишья в разгар пандемии в этом году особенно выросло количество попыток пересечения границы и количество смертей.

При поддержке ЕС ливийская береговая охрана усилила перехват лодок с мигрантами, возвращая людей на борту в Ливию.

Но ООН и несколько других правозащитных организаций осудили их возвращение в раздираемую войной страну, где многие помещены в ужасные центры содержания под стражей, которым грозят издевательства и пытки.

границ | Протеомное профилирование побегов пшеницы разных сортов

Введение

Веками широко распространенное возделывание прочно закрепило пшеницу ( Triticum ssp.) как один из важнейших источников пищи для человека, а также в качестве корма для скота, особенно в районах с умеренным климатом. В настоящее время мировое сельское хозяйство пшеницы в основном состоит из мягкой пшеницы ( Triticum aestivum ), на которую приходится 95% производства пшеницы, тогда как большая часть оставшихся 5% приходится на твердую пшеницу ( T. turgidum ssp. durum ). ) (Shewry, 2009; Peng et al., 2011). Геном домашней пшеницы состоит из ДНК двух видов-предков в случае T.turgidum (AABB), который дает гексаплоид T. aestivum (AABBDD) путем гибридизации с диплоидной травой Aegilops tauschii (Shewry, 2009). Показано, что эта культура чувствительна к широкому спектру стрессов окружающей среды (Lobell et al., 2011; Juroszek and von Tiedemann, 2013; Ray et al., 2015). Несмотря на его значение в сельском хозяйстве, сложная полиплоидная природа и большой размер его генома остаются проблемой для получения последовательности домашней пшеницы, что, в свою очередь, затрудняет проведение высокопроизводительных экспериментов омикового типа.Однако недавние достижения в области анализа генома пшеницы теперь служат отправной точкой для подробного и глобального анализа.

Уникальный характер белковой динамики, определяемый межбелковыми взаимодействиями и посттрансляционными модификациями (ПТМ) различных аминокислот, делает белки ключевыми контроллерами или регуляторами в огромном количестве клеточных процессов. Поэтому важно понимать рост, развитие растений и реакцию на окружающую среду на уровне белка. В последние годы наблюдается неуклонный рост применения протеомики на основе масс-спектрометрии (МС) в пшенице.Такие исследования в основном были направлены на выявление ключевых путей и регуляторов, участвующих в процессах развития или в реакции на стресс (Komatsu et al., 2014; Kosová et al., 2014; Hu et al., 2015). Недавние достижения в области биоинформатики позволили провести количественную оценку белков без метки (LFQ), которая позволяет избежать метаболического мечения протеомов растений, например, стабильную изотопную метку in planta (SILIP), в которой используются питательные среды, обогащенные ¹⁴ N или ¹⁵ . N-кодированные соли (Schaff et al., 2008; Го и Ли, 2011; Arsova et al., 2012), или постметаболическое мечение белков и пептидов (например, с использованием изобарных меток для относительного и абсолютного количественного определения (iTRAQ) или тандемных меток массы (TMT)). Эти достижения также позволяют одновременно анализировать большее количество образцов (Schulze and Usadel, 2010; Nahnsen et al., 2013; Olsen and Mann, 2013). LFQ не ограничивается экспериментами по протеомике дробовика, но позволяет количественно определять PTM в протеомах растений, что позволяет проводить комплексный углубленный анализ уровней белков и их модификаций (Li et al., 2015; Сильва-Санчес и др., 2015; Wu et al., 2015). Такой подход одновременного анализа фосфопротеома и протеома был продемонстрирован в нескольких исследованиях (Bonhomme et al., 2012; Facette et al., 2013; Zhang et al., 2013; Roitinger et al., 2015; Vu et al., 2016). ), тогда как фактический набор протеомных данных довольно редко использовался для коррекции изменений уровней фосфопептидов на основе изменений общих уровней белка (Roitinger et al., 2015; Vu et al., 2016).

Базы данных (фосфо) протеомов растений накопили большой объем информации о модельном двудольном растении Arabidopsis thaliana и зерновом культурном растении Oryza sativa , в основном благодаря их полностью секвенированным геномам и, в гораздо меньшей степени, также для нескольких других видов (Durek et al., 2009; Винкооп и др., 2012; Yao et al., 2014; Ву и др., 2016). Однако пока (фосфо) протеомика в пшенице только появляется (Komatsu et al., 2014; Kosová et al., 2014; Zhang et al., 2014a, b; Chateigner-Boutin et al., 2015; Chen et al., 2016) ), он все еще находится в зачаточном состоянии, и информация о протеоме и фосфопротеоме пшеницы остается ограниченной. Однако недавно был сделан важный шаг вперед благодаря обширной протеомной карте T. aestivum различных органов и стадий развития (Duncan et al., 2016).

Чтобы получить представление о протеоме тетраплоидных и гексаплоидных сортов пшеницы и, возможно, о вкладе генома в обилие белков, а также для расширения наших знаний о фосфорилированных белках пшеницы, мы применили наш недавно разработанный рабочий процесс (фосфо) протеомики (Vu et al. ., 2016). Мы сообщаем об ограниченных различиях между протеомами выбранных сортов пшеницы, предполагая, что открытие белка-кандидата для дальнейшей характеристики может быть выполнено в любом из них.Кроме того, мы стремились оценить возможность выявления предикторов роста на уровне белка путем сравнения небольшого и крупного сорта пшеницы на стадии прорастания, где они во многом схожи. Наконец, насколько нам известно, нет доступной для поиска базы данных растений, которая содержит информацию о фосфопротеомах пшеницы и которая может быть легко запрошена сообществом исследователей. Чтобы удовлетворить растущий интерес к PTM-протеомике сельскохозяйственных культур, мы добавили фосфорилированные белки пшеницы, идентифицированные в этом исследовании, в нашу ранее созданную программу PTM Viewer для растений.

Материалы и методы

Материалы для растений пшеницы

Семена двух сортов мягкой мягкой пшеницы ( T. aestivum ), карликового USU-Apogee и полукарликового Pavon 76 и твердой пшеницы ( T. turgidum ssp. durum ) сорта Senatore Cappelli были поверхностными. стерилизовали промыванием 70% этанолом с последующим погружением в 5% гипохлорит натрия на 30 мин и, наконец, промывали трижды водой MilliQ. Семена погружали в воду и стратифицировали в темноте при 4 ° C в течение 7 дней для синхронизации процесса прорастания.Затем семена помещали в пластиковые ящики, содержащие половинную концентрацию Murashige и Skoog (1/2 MS) с добавлением 0,8% агара, и проростки выращивали при 21 ° C и постоянном белом свете (100 мкЕ м ^-2 с ^{— 1} фотосинтетически активное излучение, поставляемое холодно-белыми люминесцентными вольфрамовыми трубками, Osram) в течение 5 дней. Всходы проростков из равномерно проросших семян собирали и замораживали в жидком азоте.

Обработка солью

Поверхностная стерилизация T.aestivum cv. Семена USU-Apogee и Pavon 76 проращивали на среде MS половинной концентрации, содержащей 0,8% агара. Через два дня после прорастания проростки однородного размера переносили в пробирки, содержащие среду MS полной концентрации с 30 г / л сахарозы и 0,8% агара со 100 мМ NaCl или без него. Рост растений оценивали через 14 дней после переноса. Длину побегов (верхняя часть самого длинного листа до соединения с первичным корнем) регистрировали как репрезентативную меру роста растений в присутствии / отсутствии соли.

Экстракция белка и расщепление трипсином

Экстракцию белка проводили на трех повторных биологических образцах (материал листьев независимых растений) для каждого сорта пшеницы. Один грамм тонко измельченного растительного материала суспендировали в буфере для гомогенизации, содержащем 50 мМ трис-HCl буфера (pH 8), 30% сахарозы, 5 мМ ЭДТА и 1 мМ DTT в воде Milli-Q, на которую доводились соответствующие количества Добавляли смесь ингибиторов протеазы ^TM (Roche) и смесь ингибиторов фосфатазы PhosSTOP (Roche).Образцы обрабатывали ультразвуком на льду и центрифугировали при 4 ° C в течение 15 мин при 2500 × g для удаления мусора. Супернатанты собирали и осаждение метанолом / хлороформом проводили путем добавления 3, 1 и 4 объемов метанола, хлороформа и воды соответственно. Образцы центрифугировали 10 мин при 5000 × g и водную фазу удаляли. После добавления четырех объемов метанола белки осаждали центрифугированием в течение 10 мин при 2500 × g . Гранулы промывали 80% ацетоном и ресуспендировали в 6 M гидрохлориде гуанидиния в 50 мМ буфере триэтиламмония бикарбоната (TEAB) (pH 8).Алкилирование цистеинов проводили путем добавления комбинации трис (карбоксиэтил) фосфина (TCEP, Pierce) и йодацетамида (Sigma-Aldrich) до конечных концентраций 15 мМ и 30 мМ соответственно, и образцы инкубировали в течение 15 минут при 30 ° C. ° C в темноте. Перед расщеплением образцы заменяли буфером 50 мМ TEAB (pH 8) с использованием колонок Illustra NAP-10 (GE Healthcare Life Sciences). Концентрацию белка измеряли с помощью анализа белков Bio-Rad. Один мг белкового материала расщепляли смесью трипсин / эндопротеиназа-Lys-C для MS (Promega) в течение ночи при 37 ° C при соотношении фермента к субстрату 1: 100 (вес: вес).Гидролиз подкисляли до pH ≤ 3 трифторуксусной кислотой (TFA) и обессоливали с использованием картриджей SampliQ C18 SPE (Agilent) в соответствии с инструкциями производителя. Для обогащения фосфопептидами обессоленные пептиды полностью сушили в вакуумной центрифуге и затем ресуспендировали в 130 мкл загрузочного растворителя [80% (об. / Об.) Ацетонитрила, 5% (об. / Об.) TFA]. Для анализа протеома дробовика 30 мкл сушили в вакууме и повторно растворяли в 30 мкл 2% (об. / Об.) Ацетонитрила и 0,1% (об. / Об.) TFA.

Обогащение фосфопептидов

Для обогащения фосфопептидов 100 мкл ресуспендированных пептидов инкубировали с 1 мг микросфер MagReSyn ^® Ti-IMAC в течение 20 минут при комнатной температуре.Микросферы промывали один раз промывочным растворителем 1 (80% ацетонитрил, 1% TFA, 200 мМ NaCl) и дважды промывным растворителем 2 (80% ацетонитрил, 1% TFA). Связанные фосфопептиды элюировали тремя объемами (80 мкл) 1% раствора NH ₄ OH с немедленным подкислением до pH ≤ 3 с использованием муравьиной кислоты. Перед МС-анализом образцы сушили в вакууме и повторно растворяли в 50 мкл 2% (об. / Об.) Ацетонитрила и 0,1% (об. / Об.) TFA.

Анализ ЖХ-МС / МС

Каждый образец был проанализирован дважды (т.е.е., в двух технических повторностях) с помощью ЖХ-МС / МС на Ultimate 3000 RSLC nano LC (Thermo Fisher Scientific), подключенном к масс-спектрометру Q Exactive (Thermo Fisher Scientific). Смесь образцов сначала загружали в улавливающую колонку (изготовленную на нашем предприятии, внутренний диаметр 100 мкм (I.D.) × 20 мм, шарики C18 Reprosil-HD 5 мкм, Dr. Maisch, Ammerbuch-Entringen, Германия). После промывки из улавливающей колонки образец загружали в аналитическую колонку (собственного производства, внутренний диаметр 75 мкм × 150 мм, гранулы C18 Reprosil-HD 3 мкм, Dr.Майш). Пептиды загружали загрузочным растворителем A (0,1% TFA в воде) и разделяли с линейным градиентом от 98% растворителя A ‘(0,1% муравьиной кислоты в воде) до 55% растворителя B’ [0,1% муравьиной кислоты в воде / ацетонитриле, 20/80 (об. / Об.)] В течение 170 мин при скорости потока 300 нл / мин. Затем следовала 5-минутная промывка до 99% растворителя B ’. Масс-спектрометр работал в зависимом от данных режиме положительной ионизации, автоматически переключаясь между МС и МС / МС сборами для 10 наиболее распространенных пиков в данном МС-спектре.Напряжение источника составляло 3,4 кВ, а температура капилляра составляла 275 ° C. Одно сканирование MS1 (m / z 400–2000, мишень AGC 3 × 10 ⁶ ионов, максимальное время инжекции ионов 80 мс), полученное с разрешением 70000 (при 200 m / z), сопровождалось до 10 тандемных сканирований MS (разрешение 17500 при 200 m / z) наиболее интенсивных ионов, удовлетворяющих заранее заданным критериям отбора (цель AGC 5 × 10 ⁴ ионов, максимальное время инжекции ионов 60 мс, окно изоляции 2 Да, фиксированная первая масса 140 m / z, спектр тип данных: центроид, коэффициент заполнения 2%, порог интенсивности 1.7 × 10 ⁴ , исключение неназначенных, 1, 5–8,> 8 заряженных предшественников, предпочтительно совпадение пептидов, исключение изотопов включено, время динамического исключения 20 с). Энергия столкновения HCD была установлена ​​равной 25% нормализованной энергии столкновения, а фоновый ион полидиметилциклосилоксана при 445,120025 Да использовался для внутренней калибровки (масса замка).

Поиск в базе данных

Спектры

MS / MS были проанализированы в базе данных UniProtKB T. aestivum (100641 запись, версия 08.2015) с помощью программного обеспечения MaxQuant (версия 1.5.3.8) с допуском массы прекурсора, установленным на 20 ppm для первого поиска (используется для нелинейной повторной калибровки массы) и на 4,5 ppm для основного поиска. В качестве настройки фермента был выбран трипсин. Допускались расщепления между остатками лизин / аргинин-пролин и до двух пропущенных расщеплений. S-карбамидометилирование остатков цистеина было выбрано как фиксированная модификация, а окисление остатков метионина было выбрано как переменная модификация. Уровень ложного обнаружения для идентификации пептидов и белков был установлен на 1%, а минимальная длина пептида была установлена ​​на 7.Минимальный порог оценки как для модифицированных, так и для немодифицированных пептидов был установлен на 30. Алгоритм MaxLFQ, позволяющий проводить количественную оценку без меток (Cox et al., 2014), и функция «сопоставления между сериями» были включены. Для расчета белковых соотношений были выбраны как уникальные, так и бритвенные пептиды (неуникальные пептиды, которые относятся к группе белков с наибольшим количеством идентифицированных пептидов). Важно отметить, что определение точного вклада каждой хромосомы в изобилие гомеологичных белков является сложной задачей из-за высокогомологичных последовательностей, потому что обычно требуются уникальные пептиды для идентификации белков и количественного определения, чтобы различать эти гомеологи.Все данные протеомики MS были депонированы в Консорциум ProteomeXchange через партнерский репозиторий PRIDE (Vizcaíno et al., 2014, 2016) с идентификатором набора данных PXD005437. Затем выходной файл ProteinGroups, сгенерированный поиском MaxQuant, был загружен в программу анализа данных Perseus (версия 1.5.2.6), доступную в пакете MaxQuant. Белки, которые были количественно определены по крайней мере в трех из шести повторов по крайней мере одного сорта, были сохранены. Отношения белков Log2 для интенсивностей белков LFQ центрировали путем вычитания медианы всего набора соотношений белков на образец.Отсутствующие значения LFQ были заменены случайными, хотя и небольшими числами, взятыми из нормального распределения, поскольку такие числа указывают на довольно низкие интенсивности белка или фосфозита в анализируемом образце. Для проверки различий между сортами был проведен односторонний дисперсионный анализ с FDR на основе перестановок <0,05 и 250 рандомизациями для корректировки проверки множественных гипотез. Группировка технических повторов была сохранена при рандомизации для теста ANOVA. Затем статистически значимые совпадения были оценены по шкале Z и сгруппированы в группы с помощью иерархического кластерного анализа с использованием метрики корреляции Пирсона и визуализированы с помощью MultiExperiment Viewer (MeV, версия 4.9.0).

GO Категоризация

Белковые последовательности набора данных (фосфо) протеома пшеницы были загружены в рабочую среду PLAZA monocot 3.0 (Proost et al., 2015) с использованием функции BLASTP против O. sativa ssp. База данных Japonica. Пороговое значение E для BLASTP было установлено на уровне <1 × 10 ^-5 . Категории GO результатов BLASTP были извлечены из представления функциональных аннотаций и проанализированы.

Анализ Motif-X

Алгоритм Motif-X (Chou and Schwartz, 2011) был использован для извлечения значительно обогащенных аминокислотных мотивов, окружающих идентифицированные фосфозиты.Окно последовательности было ограничено 13 аминокислотами, и пептиды переднего плана были предварительно выровнены с фосфозитом в центре окна последовательности. Набор данных протеома T. aestivum UniProtKB использовался в качестве фоновой базы данных. Порог возникновения был установлен как минимум 20 пептидов, а порог значения P был установлен на уровне <10 ^-6 .

Результаты и обсуждение

Экспериментальная установка

Для нашего анализа мы решили сосредоточиться на трех сортах пшеницы, а именно на традиционной тетраплоидной твердой пшенице ( T.turgidum под. durum cv. Senatore Cappelli) и двух гексаплоидных хлебных пшениц ( T. aestivum, L. USU-Apogee и T. aestivum, L. Pavon 76). T. aestivum L. Pavon 76 — полукарликовый сорт пшеницы, который обычно используется в программах селекции и скрещивания (Waines and Ehdaie, 2007). USU-Apogee — сорт обычной яровой пшеницы, разработанный для получения высоких урожаев в контролируемых условиях (Bugbee et al., 1997; Doherty and Jones, 2011). По сравнению с другими вариантами карликовой пшеницы, USU-Apogee демонстрирует преимущества для лабораторных исследований, такие как высокая скорость роста и раннее время цветения (через 23 дня после появления всходов при постоянном освещении при постоянной температуре 25 ° C).Кроме того, этот сорт устойчив к хлорозу кончиков листьев, который обычно возникает у пшеницы в условиях быстрого роста. Осенний сорт T. turgidum ssp. durum cv. Senatore Cappelli, местный и древний сорт твердой пшеницы, был единственным твердым вариантом с ломким позвоночником, который использовался в итальянской программе селекции (Watanabe, 2005).

Для сравнения различных вариантов мы выбрали образец материала побегов (листьев) от семидневных проростков (рис. 1). Затем мы подвергли этот материал нашей недавно разработанной (фосфо) протеомной методике (Vu et al., 2016) для картирования протеома и фосфопротеома в листьях (рис. 2).

РИСУНОК 1. Различные сорта пшеницы, использованные в этом исследовании. Сеянцы изображены через 5 дней после прорастания.

РИСУНОК 2. Протеомный рабочий процесс (фосфо), использованный в этом исследовании. Отобрано листьев проростков пшеницы.

Сравнительный анализ протеомных данных

Протеомика Shotgun привела к 282460 идентифицированным спектрам МС, которые можно было сопоставить с 22578 пептидами, которые были отнесены к 4450 группам белков.Дальнейшая фильтрация белков, присутствующих по крайней мере в трех из шести повторов в одном из сортов и по крайней мере в одном сорте, привела к 2449 количественно определяемым протеинам (дополнительная таблица S1). Большинство, а именно 1944 из этих воспроизводимо количественно определяемых белков (79,3%), было обнаружено во всех трех сортах (рис. 3).

РИСУНОК 3. Диаграмма Венна, представляющая количество воспроизводимо количественно определенных белков для каждого сорта пшеницы.

Чтобы получить представление о содержании набора данных протеома пшеницы, мы выполнили анализ GO с использованием PLAZA 3.0 для однодольных, универсальный и свободно доступный онлайн-инструмент для анализа и визуализации данных о растениях (Proost et al., 2015). Когда функциональная аннотация для анализируемого вида отсутствует, обработка протеомных данных обычно включает поиск гомологов последовательностей (с помощью BLAST) идентифицированных белков в базах данных родственных видов с достаточно аннотированным геномом для извлечения функциональной информации. В то время как последовательность генома и аннотация для других представителей рода Triticum (на данный момент) не существует в PLAZA 3.0 база данных включает представителей семейства Pooideae (настоящая трава) (например, Brachypodium distachyon и Hordeum vulgare ), а также культивируемый рис ( O. sativa ) из подсемейства Oryzoideae в Bambusoideae, Oryzoideae и Pooideae clade. O. sativa под. japonica показывает наибольшее количество терминов GO, а также терминов GO, выведенных из экспериментальных данных, и, следовательно, обеспечивает наиболее подходящую базу данных для поиска BLAST. В целом, 2438 из 2449 определенных количественно белков пшеницы можно сопоставить с 1964 O.sativa (значение и <10 ^-5 ). Меньшее количество белков O. sativa , которые могут быть связаны с идентифицированными белками пшеницы, можно объяснить полиплоидией домашней пшеницы, которая часто экспрессирует гомеологические гены от двух или трех гомеолоций (Leach et al., 2014) или по качеству поисковой базы. Результаты показали, что белки, участвующие в биологических процессах, таких как реакция на абиотический стимул, метаболизм аминокислот и метаболизм углеводов, входят в число наиболее присутствующих; в то время как молекулярные функции, как было предсказано, участвуют в связывании нуклеотидов, связывании белков, связывании РНК, транспортной активности, активности киназы, активности фосфатазы и активности регулятора ферментов.Было предсказано, что среди всех клеточных компонентов «пластида» имеет наибольшее количество идентифицированных и количественно определенных белков (рис. 4). В целом, мы смогли получить представление о данных протеома, которые охватывают ожидаемые группы белков.

РИСУНОК 4. Классификация GO количественно измеряемых белков в трех сортах пшеницы .

Всего 7150 отсутствующих значений интенсивности были заменены значениями, полученными из нормального распределения. Впоследствии статистическое тестирование с несколькими выборками ( p <0.05) на вмененных данных выявили 73 белка (из 2449), которые были значительно разнородны в изобилии между сортами пшеницы (Рисунок 5 и Дополнительная таблица S2). Иерархическая кластеризация этих 73 белков на основе их интенсивностей log2 LFQ с оценкой Z показала отчетливую разницу в содержании этих белков между T. turgidum ssp. durum cv. Образцы Senatore Cappelli и образцы гексаплоидной пшеницы. Как и ожидалось, два гексаплоидных сорта демонстрируют большое сходство по содержанию этих белков за некоторыми исключениями.Порог среднего расстояния для кластеризации 0,30 разделил 73 белка на пять терминальных узлов, представляющих пять различных подкластеров, содержащих белки с разницей в их количестве. Самый большой кластер (кластер II) содержал 39 белков, которые меньше присутствуют в T. turgidum ssp. durum cv. Сенаторе Каппелли. Последующий анализ GO кластера II — с использованием всех количественно определенных белков в качестве фоновой модели ( p ≤ 0,01) — показал 40-кратное обогащение белков, участвующих в биосинтезе оксилипина (дополнительная таблица S3).Оксилипины, например жасмоновая кислота, известны как важные сигнальные молекулы во время роста, особенно при стрессовых реакциях и врожденном иммунитете (Eckardt, 2008). Примечательно, что четыре предполагаемых линолеат-9S-липоксигеназы (W5BZ90, W5BBF4, W5G4K3 и W5F9D7; дополнительная таблица S2), которые могут играть роль в стресс-ответном метаболизме оксилипина, были более распространены у гексаплоидных сортов. Напротив, кластер V (24 белка) содержит белки с более высоким содержанием в тетраплоидной пшенице. Здесь анализ GO в кластере V привел к биосинтезу лигнина как единственному обогащенному специфическому термину биологических процессов, представляющему белки с более высоким содержанием в T.turgidum под. durum cv. Сенаторе Капелли (дополнительная таблица S3). Кроме того, три гораздо меньших кластера, кластер I (два белка), III (четыре белка) и IV (четыре белка), отображали белки с разными уровнями между двумя гексаплоидными сортами пшеницы. Возможно, эти различия представляют собой разный потенциал реакции на триггеры окружающей среды или лежат в основе потенциала роста двух вариантов T. aestivum , что делает их полезными предикторами роста на ранней стадии проростков.Например, кластер I содержал шаперон DnaK семейства HSP70 (D3YE92) и белок корня солевого стресса (RS1; W5DJR4), которые больше присутствовали у T. aestivum L. USU-Apogee по сравнению с T. aestivum L. Pavon 76 (в 8,3 и 17,2 раза соответственно) и по сравнению с T. turgidum ssp. durum cv. Senatore Cappelli (в 10,2 и 18,8 раза соответственно), возможно, помогая растениям предвидеть и / или выжить в стрессовых условиях роста (Wang et al., 2004).С другой стороны, кластер IV содержал два окислительно-восстановительных фермента, гомолог изофлавонредуктазы (W5A5F4) и гомолог хинон-оксидоредуктазы (W5APP4), которых было больше у T. aestivum L. Pavon 76 по сравнению с T. aestivum. L. USU-Apogee (в 3,4 и 5 раз соответственно) и по сравнению с T. turgidum ssp. durum cv. Senatore Cappelli (4,7 и 3,8 раза соответственно). В этом контексте, например, на рисе было показано, что экспрессия гена изофлавонредуктазы OsIRL индуцируется окислителями (Kim et al., 2010). Следовательно, накопление белков изофлавонредуктазы может повысить устойчивость сорта к окислительному стрессу. В целом кажется заманчивым предположить, что разница между протеомами сорта пшеницы может быть результатом различных особенностей развития или физиологических особенностей, отраженных, например, в разном количестве белков, участвующих во вторичном метаболизме, но это также может указывать на различия в устойчивости к экологические стрессы различных сортов пшеницы, особенно тетраплоидной и гексаплоидной пшеницы (Sairam et al., 2001; Ян и др., 2014; Ли и др., 2017).

РИСУНОК 5. Тепловая карта, представляющая белки со значительным разным содержанием в технических репликах с соответствующими биологическими репликами вариантов пшеницы из протеомного анализа. Вмененное значение Log2-интенсивности белков составляло Z для кластеризации. Показаны идентификаторы пшеницы, а описание белка, взятое из ортологов в Oryza sativa , можно найти в дополнительной таблице S2.

Некоторые различия, выявленные в этом исследовании, могут позволить расширить наши представления о взаимодействии генома в экспрессии белков. Хотя для некоторых белков были обнаружены большие различия между тетраплоидными и гексаплоидными сортами пшеницы (Islam et al., 2003), наше исследование, похоже, предполагает, что это нельзя обобщать.

Устойчивость к солевому стрессу сеянцев УСУ-Апогей и Павон 76

Ранее было показано, что гексаплоидная пшеница более устойчива к соли, чем тетраплоидный сорт (Munns and Tester, 2008; Yang et al., 2014). Частично это было связано с ВЫСОКОАФФИНИРОВАННЫМ ТРАНСПОРТОМ K ⁺ TRANSPORTER 1; 5 (HKT1; 5) (Yang et al., 2014). Поразительно, что кластер I также показывает заметную разницу между гексаплоидными сортами в уровнях RS1, который играет роль в солевой реакции ячменя и томатов (Nveawiah-Yoho et al., 2013; Witzel et al., 2014). Таким образом, также может быть разница в солевой реакции между T. aestivum Pavon 76 и USU-Apogee. Поэтому мы проверили эту гипотезу с учетом физиологической реакции проростков двух сортов на солевой стресс. T. aestivum Проростки Pavon 76 и USU-Apogee выращивали в присутствии 100 мМ соли, что считается промежуточным осмотическим стрессом, но для молодых проростков эта концентрация могла вызвать осмотический шок (Шавруков, 2013). Исходя из порядка величины обнаруженной нами разницы в содержании белка RS1 между сортами, ожидалось, что сорт T. aestivum USU-Apogee будет более устойчив к солевому стрессу, тогда как сорт T. aestivum Pavon 76 сорт будет менее терпимым.Действительно, в то время как развитие проростков T. aestivum USU-Apogee было довольно умеренно сниженным, солевой стресс сильно задерживал развитие проростков T. aestivum Pavon 76 (рис. 6А). Количественная оценка длины побегов показала сильное снижение роста побегов, а именно почти 95% у проростков T. aestivum Pavon 76 в условиях солевого стресса по сравнению с контрольными условиями, тогда как у проростков T. aestivum USU-Apogee наблюдалось гораздо менее серьезное снижение всего 40% (Рисунок 6B).В заключение, наш подход и набор данных для сравнительной протеомики являются мощным инструментом для прогнозирования реакций роста и стресса сортов T. aestivum , а также для открытия генов и белков, связанных с этими ответами.

РИСУНОК 6. Устойчивость к солевому стрессу у проростков T. aestivum Pavon 76 и USU-Apogee. (A) Репрезентативное изображение проростков культурных сортов через 14 дней после обработки в условиях контроля и солевого стресса. (B) Количественная оценка длины побегов проростков T. aestivum Pavon 76 и USU-Apogee ( n = 8 для USU-Apogee и 4 для Pavon 76). Полоса ошибок указывает на стандартную ошибку.

Идентификация фосфорилированных белков

Посредством обогащения Ti-IMAC и последующего анализа ЖХ-МС / МС мы идентифицировали 376 фосфопептидов, содержащих 483 фосфорилированных сайта, представляющих 291 фосфопротеин в образцах всех трех сортов пшеницы (дополнительная таблица S4).В целом мы обнаружили 85% фосфозитов pS, 13% pT и 2% pY. По сравнению с другим исследованием, которое проводилось на молодых листьях проростков двух сортов T. aestivum (Lv et al., 2014), 128 фосфозитов перекрывались, что означает, что 355 фосфозитов были однозначно идентифицированы в нашем эксперименте (дополнительная таблица S5. ). Фильтрация фосфозитов по крайней мере с 3-мя интенсивностями из 6-ти повторов по крайней мере в одном из образцов привела к 289 фосфозитам. Перекрытие этих участков между тремя сортами пшеницы было большим, со 152 фосфозитами, общими для всех трех сортов (Рисунок 7A), и ни один из фосфозитов не отличался статистически значимо между сортами пшеницы согласно тесту с множественными выборками (FDR <0.05).

РИСУНОК 7. (A) Диаграмма Венна, представляющая количество воспроизводимо количественно определенных фосфозитов в каждом варианте пшеницы. (B) Анализ Motif-X на обогащение аминокислотных мотивов вокруг идентифицированных фосфозитов.

На сегодняшний день у растений идентифицировано много специфичных для киназ мотивов фосфорилирования. Мы использовали идентифицированные фосфозиты, чтобы выявить потенциальные мотивы фосфорилирования и связанные с ними активные киназы с помощью анализа Motif-X (рис. 7B).Из-за небольшого количества идентифицированных сайтов не было обнаружено обогащения мотивов фосфотреонином и фосфотирозином. Среди мотивов для фосфосерина пролин-направленный мотив [sP] был наиболее богатым. Пептиды, содержащие этот мотив, известны как важные субстраты для MAP-киназ (MAPK), неферментирующей1-связанной с сахарозой протеинкиназы 2 (SnRK2), рецептор-подобных киназ (RLK), протеинкиназ семейства AGC PKA, PKG и PKC, CDK ( циклин-зависимые киназы), CDPK (кальций-зависимые протеинкиназы) и SLK (STE20-подобные киназы).Кроме того, общий кислотный мотив [sD] и его субмотив [sD.E], которые, как известно, являются мишенью для CDPK, среди прочих, также были обогащены; тогда как мотив [R..s] был единственным основным мотивом, обнаруженным при анализе.

Недавно мы разработали PTM Viewer (Vu et al., 2016), который мы постоянно обновляем и который можно использовать для запроса PTM в растениях. Фосфорилированные белки, идентифицированные в пшенице в этой работе, были добавлены в эту базу данных и общедоступны. Таким образом, это первое хранилище идентифицированных фосфорилированных белков пшеницы.

Заключение

Целью данного исследования было провести протеомный анализ пшеницы и оценить различия между T. aestivum и T. turgidum ssp. durum на протеомном уровне. Кроме того, мы также стремились применить наш конвейер фосфопротеомики для сообщения о ряде фосфозитов, некоторые из которых были однозначно идентифицированы в этом исследовании, с которыми теперь можно ознакомиться в программе PTM Viewer для растений. Используя простую и оптимизированную платформу, которая ранее была адаптирована для количественной (фосфо) протеомики у Arabidopsis и кукурузы, мы идентифицировали 4450 белков с помощью протеомики дробовика и 483 фосфозита с помощью фосфопротеомики, из которых 2449 белков (51.8%) и 289 фосфозитов (59,8%) допущены для количественного анализа. Кроме того, наши результаты свидетельствуют о большом совпадении между сортами пшеницы в отношении обнаруживаемых (фосфорилированных) белков, предполагая, что исследование, сфокусированное на исследованиях, не обязательно должно относиться к наиболее экономически значимому сорту пшеницы. Кроме того, наша протеомика позволила выявить предполагаемые предикторы роста пшеницы и / или вероятных кандидатов, объясняющих дифференциальные реакции на триггеры окружающей среды. Наконец, наш набор данных, сравнивающий тетраплоидные и гексаплоидные протеомы пшеницы, является отправной точкой для изучения взаимодействия генома в экспрессии белка.

Авторские взносы

LV, ES и IV выполнили исследование, MV и FC разработали базу данных, LV, ID и KG написали рукопись, а все авторы прокомментировали текст.

Финансирование

LV является обладателем международной степени доктора философии VIB. программа стипендий. ES был научным сотрудником Исследовательского фонда Фландрии.

Заявление о конфликте интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могут быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Благодарность

Мы благодарим Джонатана Аткинсона, Джованни Джулиано и Хью Джонса за любезно предоставленные T. aestivum L. Pavon 76, T. turgidum ssp. durum cv. Senatore Cappelli и семян T. aestivum USU-Apogee, соответственно.

Дополнительные материалы

Дополнительные материалы к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www.frontiersin.org/article/10.3389/fpls.2017.00332/full#supplementary-material

Сноски

1. http: // www.Wheatgenome.org/
2. bioinformatics.psb.ugent.be/webtools/ptm_viewer/
3. http://bioinformatics.psb.ugent.be/plaza/versions/plaza_v3_monocots/
4. bioinformatics.psb.ugent.be/webtools/ptm_viewer/

Список литературы

Арсова Б., Киршневска С., Шульце В. X. (2012). Использование тяжелого азота в экспериментах по количественной протеомике растений. Trends Plant Sci. 17, 102–112. DOI: 10.1016 / j.tplants.2011.11.001

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Bonhomme, L., Valot, B., Tardieu, F., and Zivy, M. (2012). Динамика фосфопротеома при изменении водного статуса растений выявляет ранние события, связанные с быстрой адаптацией к росту листьев кукурузы. Мол. Клетка. Протеомика 11, 957–972.

PubMed Аннотация | Google Scholar

Багби Б., Кернер Г., Альбрехтсен Р., Дьюи В. и Клоусон С. (1997). Регистрация «УрГУ-Апогей».Пшеница. Crop Sci. 37, 626.

Google Scholar

Шатеньер-Бутин, А. Л., Сулиман, М., Буше, Б., Альварадо, К., Лолье, В., Роньо, Х. и др. (2015). Эндомембранная протеомика выявляет предполагаемые ферменты, участвующие в метаболизме клеточной стенки во внешних слоях зерна пшеницы. J. Exp. Бот. 66, 2649–2658. DOI: 10.1093 / jxb / erv075

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Chen, G.-X., Zhou, J.-W., Liu, Y.-L., Lu, X.-B., Han, C.-X., Zhang, W.-Y., et al. (2016). Биосинтез и регуляция амилозы и амилопектина пшеницы на основе протеомной и фосфопротеомной характеристики белков, связывающих гранулы. Sci. Отчет 6: 33111. DOI: 10.1038 / srep33111

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Кокс, Дж., Хайн, М. Ю., Любер, К. А., Парон, И., Нагарадж, Н., и Манн, М. (2014). MaxLFQ обеспечивает точную количественную оценку протеома без метки за счет отложенной нормализации и экстракции максимального соотношения пептидов. Мол. Клетка. Протеомика 13, 2513–2526. DOI: 10.1074 / mcp.M113.031591

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Доэрти, А., Джонс, Х. Д. (2011). USU-Apogee: быстроразвивающаяся пшеница с потенциалом в качестве модели трансформации для функциональной геномики пшеницы. Asp. Прил. Биол. 110, 82.

Google Scholar

Дункан, О., Трёш, Дж., Фенске, Р., Тейлор, Н. Л., и Миллар, А. Х. (2016). Ресурс: картирование протеома Triticum aestivum . Plant J. 89, 601–616. DOI: 10.1111 / tpj.13402

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст

Durek, P., Schmidt, R., Heazlewood, J. L., Jones, A., MacLean, D., Nagel, A., et al. (2009). PhosPhAt: база данных сайтов фосфорилирования Arabidopsis thaliana . Обновление. Nucleic Acids Res. 38, 828–834. DOI: 10.1093 / nar / gkp810

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Эккардт, Н. А. (2008). Передача сигналов оксилипина в ответах растений на стресс. Растительная клетка 20, 495–497.

Google Scholar

Фасетт, М. Р., Шен, З., Бьёрнсдоттир, Ф. Р., Бриггс, С. П., и Смит, Л. Г. (2013). Параллельный протеомный и фосфопротеомный анализ последовательных стадий развития листьев кукурузы. Растительная клетка 25, 2798–2812. DOI: 10.1105 / tpc.113.112227

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Го, Г., и Ли, Н. (2011). Относительное и точное измерение содержания белка с использованием метки стабильного изотопа 15N у Arabidopsis (SILIA). Фитохимия 72, 1028–1039. DOI: 10.1016 / j.phytochem.2011.01.007

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ху Дж., Рампич К., Быкова Н. В. (2015). Достижения в протеомике растений в направлении повышения урожайности и стрессоустойчивостиx. Фронт. Plant Sci. 6: 209. DOI: 10.3389 / fpls.2015.00209

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ислам, Н., Цудзимото, Х., и Хирано, Х. (2003).Протеомный анализ диплоидной, тетраплоидной и гексаплоидной пшеницы: к пониманию взаимодействия генома в экспрессии белка. Proteomics 3, 549–557.

PubMed Аннотация | Google Scholar

Юрошек П. и фон Тидеманн А. (2013). Изменение климата и потенциальные будущие риски, связанные с болезнями пшеницы: обзор. Eur. J. Plant Pathol. 136, 21–33.

Google Scholar

Ким, С. Г., Ким, С. Т., Ван, Ю., Ким, С. К., Ли, К. Х., Ким, К.K., et al. (2010). Сверхэкспрессия гена, подобного изофлавонредуктазе риса (OsIRL), придает толерантность к реактивным формам кислорода. Physiol. Завод. 138, 1–9. DOI: 10.1111 / j.1399-3054.2009.01290.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Косова, К., Витамвас, П., и Прашил, И. Т. (2014). Протеомика стрессовых реакций пшеницы и ячменя — поиск потенциальных белковых маркеров стрессоустойчивости. Фронт. Plant Sci. 5: 711. DOI: 10.3389 / fpls.2014.00711

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Лич, Л. Дж., Белфилд, Э. Дж., Цзян, К., Браун, К., Митани, А., и Харберд, Н. П. (2014). Паттерны экспрессии гомеологичных генов, показанные секвенированием РНК в гексаплоидной мягкой пшенице. BMC Genomics 15: 276. DOI: 10.1186 / 1471-2164-15-276

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ли, Дж., Сильва-Санчес, К., Чжан, Т., Чен, С., и Ли, Х. (2015).Технологии и приложения фосфопротеомики в исследованиях биологии растений. Фронт. Plant Sci. 6: 430. DOI: 10.3389 / fpls.2015.00430

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ли, Ю. П., Ли, Ю. Ю., Ли, Д. Ю., Ван, С. В., и Чжан, С. К. (2017). Фотосинтетический ответ тетраплоидной и гексаплоидной пшеницы на водный стресс. Photosynthetica 55, 1–13.

Google Scholar

Лобелл, Д. Б., Шленкер, В., и Коста-Робертс, Дж.(2011). Климатические тенденции и мировое растениеводство с 1980 года. Science 333, 1186–1189.

Google Scholar

Lv, D. W., Ge, P., Zhang, M., Cheng, Z. W., Li, X. H., and Yan, Y. M. (2014). Интегративный сетевой анализ сигнальных каскадов в листьях проростков мягкой пшеницы с помощью крупномасштабного фосфопротеомного профилирования. J. Proteome Res. 13, 2381–2395. DOI: 10.1021 / pr401184v

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Нвеавиа-Йохо, П., Zhou, J., Palmer, M., Sauve, R.J., Zhou, S., Howe, K.J., et al. (2013). Идентификация белков на солеустойчивость с использованием сравнительного протеомного анализа образцов томатов с контрастной солеустойчивостью. J. Am. Soc. Hortic. Sci. 138, 382–394.

Google Scholar

Олсен, Дж. В., и Манн, М. (2013). Состояние масштабного анализа посттрансляционных модификаций методом масс-спектрометрии. Мол. Клетка. Протеомика 12, 3444–3452. DOI: 10,1074 / mcp.O113.034181

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Пэн Дж. Х., Сан Д. и Нево Э. (2011). Эволюция, генетика и геномика приручения пшеницы. Мол. Порода. 28, 281–301.

Google Scholar

Проост, С., Ван Бел, М., Ваничут, Д., Ван Де Пир, Ю., Инзе, Д., Мюллер-Робер, Б., и др. (2015). PLAZA 3.0: точка доступа к сравнительной геномике растений. Nucleic Acids Res. 43, D974 – D981. DOI: 10.1093 / nar / gku986

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Рэй, Д.К., Гербер, Дж. С., Макдональд, Г. К., и Уэст, П. К. (2015). Изменение климата объясняет треть изменчивости урожайности в мире. Nat. Commun. 6: 5989. DOI: 10.1038 / ncomms6989

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ройтингер, Э., Хофер, М., Кехер, Т., Пихлер, П., Новачкова, М., Янг, Дж. И др. (2015). Количественная фосфопротеомика мутантной телеангиэктазии атаксии (ATM) и телеангиэктазии атаксии-мутации и rad3-зависимой (ATR) реакции на повреждение ДНК у Arabidopsis thaliana.Мол. Клетка. Протеомика 14, 556–571. DOI: 10.1074 / mcp.M114.040352

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Сайрам, Р. К., Чандрасекар, В., и Шривастава, Г. К. (2001). Сравнение гексаплоидных и тетраплоидных сортов пшеницы в их реакции на водный стресс. Biol. Завод. 44, 89–94.

Google Scholar

Шафф, Дж. Э., Мбеункуи, Ф., Блэкберн, К., Берд, Д. М., и Гоше, М. Б. (2008). SILIP: новый метод мечения стабильных изотопов для количественного протеомного анализа in planta. Plant J. 56, 840–854. DOI: 10.1111 / j.1365-313X.2008.03639.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Vizcaíno, J. A., Csordas, A., Del-Toro, N., Dianes, J. A., Griss, J., Lavidas, I., et al. (2016). Обновление базы данных PRIDE и связанных с ней инструментов в 2016 году. Nucleic Acids Res. 44, D447 – D456. DOI: 10.1093 / nar / gkv1145

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Vizcaíno, J. A., Deutsch, E.W., Wang, R., Csordas, A., Reisinger, F., Ríos, D., et al. (2014). ProteomeXchange обеспечивает глобально скоординированную передачу и распространение протеомных данных. Nat. Biotechnol. 32, 223–226.

Google Scholar

Vu, L. D., Stes, E., Van Bel, M., Nelissen, H., Maddelein, D., Inzé, D., et al. (2016). Современный рабочий процесс для (фосфо) протеомики растений выявляет дифференциальные события фосфорилирования в зависимости от засухи в листьях кукурузы. J. Proteome Res. 15, 4304–4317.

PubMed Аннотация | Google Scholar

Waines, J. G., and Ehdaie, B. (2007). Одомашнивание и физиология сельскохозяйственных культур: корни пшеницы зеленой революции. Ann. Бот. 100, 991–998.

PubMed Аннотация | Google Scholar

Ван В., Винокур Б., Шосеев О. и Альтман А. (2004). Роль белков теплового шока растений и молекулярных шаперонов в реакции на абиотический стресс. Trends Plant Sci. 9, 244–252. DOI: 10.1016 / j.tplants.2004.03.006

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ватанабэ, Н.(2005). Возникновение и наследование фенотипа ломкого позвоночника у итальянских сортов твердой пшеницы. Euphytica 142, 247–251.

Google Scholar

Винкооп, С., Штаудингер, К., Хоэнвартер, В., Векверт, В., Эгельхофер, В. (2012). ProMEX — справочная база данных масс-спектров для протеомики растений. Фронт. Plant Sci. 3: 125. DOI: 10.3389 / fpls.2012.00125

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Витцель, К., Матрос, А., Стрикерт, М., Каспар, С., Пойкерт, М., Мюлинг, К. Х. и др. (2014). Солевой стресс в корнях контрастных генотипов ячменя выявляет разные во времени и генотип-специфические закономерности для определенных белков. Мол. Завод 7, 336–355. DOI: 10.1093 / mp / sst063

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

У X., Гун Ф., Цао Д., Ху X. и Ван У. (2015). Достижения в протеомике сельскохозяйственных культур: ПТМ белков при абиотическом стрессе. Протеомика 16, 847–865.DOI: 10.1002 / pmic.201500301

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ян, К., Чжао, Л., Чжан, Х., Ян, З., Ван, Х., Вэнь, С. и др. (2014). Эволюция физиологических реакций на солевой стресс у гексаплоидной пшеницы. Proc. Natl. Акад. Sci. США 111, 11882–11887. DOI: 10.1073 / pnas.1412839111

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Яо, К., Ге, Х., Ву, С., Чжан, Н., Чен, В., Сюй, К. и др. (2014).P3DB 3.0: от сайтов фосфорилирования растений до белковых сетей. Nucleic Acids Res. 42, 1206–1213. DOI: 10.1093 / nar / gkt1135

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Zhang, H., Zhou, H., Berke, L., Heck, A. J. R., Mohammed, S., Scheres, B., et al. (2013). Количественная фосфопротеомика после индукции бокового корня, стимулированной ауксином, позволяет идентифицировать сайт фосфорилирования белка SNX1, необходимый для роста. Мол. Клетка. Протеомика 12, 1158–1169.DOI: 10.1074 / mcp.M112.021220

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Zhang, M., Lv, D., Ge, P., Bian, Y., Chen, G., Zhu, G., et al. (2014a). Анализ фосфопротеома выявил новые механизмы защиты от засухи и защиты листьев проростков мягкой пшеницы ( Triticum aestivum L.). J. Proteomics 109, 290–308. DOI: 10.1016 / j.jprot.2014.07.010

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Чжан, М., Ma, C.-Y., Lv, D.-W., Zhen, S.-M., Li, X.-H., and Yan, Y.-M. (2014b). Сравнительный фосфопротеомный анализ развивающихся зерен мягкой пшеницы ( Triticum aestivum L.) в условиях обильного полива и водного дефицита. J. Proteome Res. 13, 4281–4297. DOI: 10.1021 / pr500400t

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ливийская береговая охрана стреляет в морских мигрантов

Предоставлено Sea-Watch

Опубликовано
1 июля 2021 г., 19:45, автор:

Морской исполнительный

Ливийская береговая охрана хорошо известна тем, что возвращает морских мигрантов в пределы печально известной системы содержания под стражей в Ливии, где насилие настолько широко распространено, что даже группа MSF по оказанию медицинской помощи в зоне военных действий не войдет.Теперь, по данным миграционной неправительственной организации Sea-Watch International, морские силы безопасности Ливии применяют еще больше насилия для выполнения своей миссии по перехвату перегруженных лодок с мигрантами.

В среду экипаж Sea-Watch заметил ливийский патрульный катер, взаимодействующий с судном-мигрантом в зоне координации САР Мальты. На видео видно, что экипаж лодки произвел выстрелы в направлении лодки. Также выяснилось, что судно пыталось создать обстановку ближнего боя и несколько раз чуть не протаранило меньшую лодку.Также было заснято, как экипаж бросал предметы в пассажиров мигрирующего судна.

Вчера #Seabird стал свидетелем жестокого нападения так называемой ливийской береговой охраны в глубине мальтийской зоны SAR. Наше видео показывает: В направлении лодки велись выстрелы, так называемая береговая охрана Ливии несколько раз пыталась протаранить лодку и бросала предметы в людей. pic.twitter.com/0C2YSmcPoO

— Sea-Watch International (@seawatch_intl) 1 июля 2021 г.

Sea-Watch идентифицировала патрульный катер как судно Ras Jadir, , поставленное Италией, которое было передано в дар Ливийскому правительству национального согласия (ПНС) в начале 2017 года.

Это не первый раз, когда команда Ras Jadir вызывает споры. 6 ноября 2017 года — примерно через шесть месяцев после того, как правительство Италии передало лодку в дар Ливийской береговой охране — Ras Jadir приблизилось к тонущему плоту для мигрантов примерно в 30 морских милях от побережья Ливии. Спасательное судно Sea-Watch, Sea-Watch 3, , также присутствовало на месте происшествия. Ее спасательные команды RHIB развернулись, пытаясь вытащить мигрантов из воды, и другие члены экипажа снимали столкновение.Видео показывает, что экипаж Ras Jadir препятствовал этой спасательной операции, бросая предметы в RHIB; В последовавшей за этим схватке около 50 человек утонули.

Согласно Amnesty, чиновники береговой охраны Ливии, как известно, действуют в сговоре с сетями контрабанды людей, как и многие их коллеги из прибрежных ливийских правоохранительных органов и управления миграцией.

В 2017 году Верховный комиссар ООН по правам человека заявил, что поддержка Европейским союзом береговой охраны Ливии «бесчеловечна», поскольку в результате тысячи людей подвергаются «невообразимым ужасам» в ливийских центрах содержания под стражей.Обстоятельства могут ухудшаться: в прошлом месяце MSF сообщила об использовании автоматического оружия против задержанных в центре заключения Абу-Салим, что привело к многочисленным жертвам и жестокому насилию в отношении обитателей центра в Мабани. Организация объявила, что приостановит работу на объектах из-за риска для персонала.

По данным MSF, всплеск насилия в центрах содержания под стражей параллелен резкому увеличению количества операций по перехвату и возвращению, проведенных ливийской береговой охраной.При поддержке европейских стран агентство с начала года перехватило около 14 000 выезжающих за границу мигрантов — больше, чем общее количество, которого оно достигло за весь 2020 год. Этот успех на море привел к серьезной перенаселенности и ухудшению условий на объектах на берегу.